茶多酚EGCG對(duì)人卵巢癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移影響及其機(jī)制的初步探討.pdf

1、卵巢癌作為一類常見的女性癌癥，是目前世界上第5大高發(fā)癌癥，嚴(yán)重威脅著女性的健康和生命，而且80％以上的患者是死于癌癥的轉(zhuǎn)移。因此，預(yù)防癌細(xì)胞的惡性侵襲和轉(zhuǎn)移是抗擊卵巢癌的行之有效的治療手段。
　　在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中，炎癥被認(rèn)為是重要因素之一。研究證明長(zhǎng)期存在于局部的炎癥通過DNA損傷、抵抗凋亡等機(jī)制誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生，并能夠進(jìn)一步募集大量免疫細(xì)胞侵潤(rùn)，從而形成腫瘤微環(huán)境繼續(xù)促進(jìn)腫瘤發(fā)展。
　　沒食子兒茶素沒食子酸酯EGCG作為

2、綠茶的主要成分，具有較廣泛的抗腫瘤及抗炎活性。EGCG的抗腫瘤機(jī)制尚未被人們系統(tǒng)明確的了解，還有待進(jìn)一步研究。因此本研究選取低轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞株HO-8910和從HO-8910分化而來的高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞株HO-8910PM為研究對(duì)象，首先給予卵巢癌細(xì)胞系不同劑量的EGCG處理，篩選出抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)作用效果顯著的50μM作為最終的EGCG工作濃度。
　　然后，我們分別用50μM EGCG給予卵巢癌細(xì)胞預(yù)處理，通過腫瘤細(xì)胞的軟瓊脂克隆形

3、成試驗(yàn)、創(chuàng)口愈合實(shí)驗(yàn)和基質(zhì)膠侵染實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)轉(zhuǎn)移能力不同的兩株卵巢癌細(xì)胞對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組中癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移表型的變化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明與HO-8910相比HO-8910PM表現(xiàn)出更強(qiáng)的增殖及轉(zhuǎn)移活力；50μM EGCG能顯著抑制兩株卵巢癌細(xì)胞的非錨定生長(zhǎng)能力、遷移能力以及侵襲轉(zhuǎn)移能力，且對(duì)高轉(zhuǎn)移株HO-8910PM的作用效果尤為顯著。
　　最后，再用50μM EGCG預(yù)處理卵巢癌細(xì)胞后，利用熒光定量PCR技術(shù)在mRNA水平檢測(cè)炎癥基因IL-8

4、、TNF-α及基因MMP9、VEGF表達(dá)的變化，利用ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞因子IL-8和TNF-α的分泌水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明50μM EGCG使高轉(zhuǎn)移株HO-8910PM的IL-8、TNF-α的表達(dá)水平顯著下調(diào)，而低轉(zhuǎn)移株雖有下調(diào)趨勢(shì)，但作用效果并不顯著。50μM EGCG處理后，兩株卵巢癌細(xì)胞MMP9和VEGF基因的表達(dá)水平均沒有受到影響。
　　綜上，我們認(rèn)為EGCG能降低癌細(xì)胞的生長(zhǎng)能力，而低劑量的EGCG能針對(duì)性地降低惡性