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文檔簡介
1、【目的】檢測(cè)Leptin對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行研究。
【方法】用人重組Leptin蛋白對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞進(jìn)行處理,Transwell技術(shù)檢測(cè)對(duì)照組與Leptin處理24小時(shí)后的SKOV3細(xì)胞的遷移、侵襲能力;顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài);采用小分子RNA干擾技術(shù)干擾TWIST1基因表達(dá);運(yùn)用RT-PCR,Real-time PCR技術(shù)分別比較各組SKOV3細(xì)胞的mRNA表達(dá)情況;Western bl
2、ot技術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞相關(guān)基因蛋白水平表達(dá)情況。
【結(jié)果】Leptin處理后的SKOV3細(xì)胞遷移及侵襲能力均較對(duì)照組明顯增強(qiáng),細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化。與對(duì)照組相比,Leptin處理后的SKOV3細(xì)胞E-cadherin的表達(dá)量在mRNA水平及蛋白水平均有明顯下調(diào),同時(shí)該組細(xì)胞的N-cadherin及
Vimentin表達(dá)均明顯增高。此外,Leptin處理后的SKOV3細(xì)胞TWIST1基因表達(dá)在mRNA及蛋白水平均較對(duì)照組
3、明顯增加。siRNA沉默TWIST1基因后再用Leptin處理SKOV3細(xì)胞,較單純Leptin處理組相比,遷移及侵襲能力明顯降低,同時(shí)在mRNA及蛋白水平,E-cadherin的表達(dá)水平增加,N-cadherin及Vimentin的表達(dá)降低。
【結(jié)論】Leptin能促進(jìn)卵巢癌SKOV3細(xì)胞的遷移和侵襲,其機(jī)制可能是通過Leptin上調(diào)SKOV3細(xì)胞中TWIST1基因表達(dá),促進(jìn)其發(fā)生上皮間質(zhì)化,從而促進(jìn)SKOV3細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移
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