GnRH主動(dòng)免疫對(duì)雄性藏綿羊免疫功能的影響.pdf

1、在養(yǎng)羊生產(chǎn)中，通常采用外科閹割手術(shù)進(jìn)行去勢(shì)，以防止羊肉中的“膻味”，避免性早熟對(duì)生長(zhǎng)和育肥所帶來(lái)的不利影響以便于飼養(yǎng)和管理。然而，傳統(tǒng)外科閹割去勢(shì)可引起動(dòng)物高度應(yīng)激，外科傷口容易感染甚至造成動(dòng)物死亡，影響動(dòng)物生產(chǎn)效率，不能滿足動(dòng)物福利要求等諸多不足。目前的研究表明GnRH（Gonadotropin releasinghormone，GnRH）主動(dòng)免疫能取得類似于外科閹割去勢(shì)的效果，并且能克服外科閹割去勢(shì)的不足，不失為取代傳統(tǒng)外科閹割的好

2、方法。
　　藏綿羊是青藏高原的主要畜種之一，主要分布地區(qū)包括羌塘高原、阿里東西部和藏南高原等藏西北、藏東南干旱、半干旱地區(qū)，具耐寒、耐旱、耐缺氧等特點(diǎn)，飼養(yǎng)藏綿羊是當(dāng)?shù)啬撩袷杖氲闹饕獊?lái)源。在本課題組已開(kāi)展GnRH主動(dòng)免疫對(duì)雄性藏綿羊生殖性能影響的基礎(chǔ)上，本試驗(yàn)將進(jìn)一步探究GnRH主動(dòng)免疫對(duì)雄性藏綿羊免疫功能的影響，為免疫去勢(shì)這一新方法將來(lái)在養(yǎng)羊?qū)嵺`中的應(yīng)用提供更堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。
　　試驗(yàn)選取24周齡、體重為17-19Kg的雄

3、性藏綿羊30只，隨機(jī)分為三組，每組10只。其中一組不做任何處理，為空白對(duì)照組;一組在試驗(yàn)開(kāi)始前一周進(jìn)行外科手術(shù)去勢(shì)，為手術(shù)去勢(shì)組;剩余一組于25周齡時(shí)頸部皮下注射2mL GnRH并列體二聚物與卵清蛋白連接復(fù)合物(TDK-OVA)的Specol乳化劑（含TDK100μg），8周后加強(qiáng)免疫，注射劑量及方法同初次免疫，為免疫去勢(shì)組。
　　初免當(dāng)天記為0 wpv。初免當(dāng)天及以后每4周頸靜脈采集血樣，直至屠宰。加強(qiáng)免疫后8周（即16 wpv

4、），屠宰所有試驗(yàn)綿羊，采集睪丸及脾臟組織，用熒光定量PCR分析脾臟組織CD4、CD8、CD19淋巴細(xì)胞的mRNA表達(dá)量及脾臟雌激素α受體（ER-α）、雌激素β受體(ER-β)和雄激素受體(AR)mRNA表達(dá)量，用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定整個(gè)試驗(yàn)期間血清中GnRH抗體滴度、睪酮含量及屠宰當(dāng)天血清中免疫因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ濃度。
　　初免后機(jī)體血清中產(chǎn)生GnRH抗體，加免后4周達(dá)到最高峰(55.

5、62％)，以后保持在較高水平，直至屠宰(48.85％);與空白對(duì)照組相比，屠宰時(shí)免疫去勢(shì)組睪丸萎縮，其重量和體積均下降到對(duì)照組睪丸的80％(P＜0.05);GnRH主動(dòng)免疫后綿羊血清T含量下降，從4 wpv到屠宰(16 wpv)均顯著低于空白對(duì)照組(P＜0.05):屠宰時(shí)，免疫去勢(shì)和手術(shù)去勢(shì)顯著提高羊血清IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α濃度(P＜0.05)，而對(duì)血清IFN-γ濃度無(wú)影響(P＞0.05)，但免疫去勢(shì)組綿羊血清中IL

6、-4和IL-6濃度顯著低于手術(shù)去勢(shì)組(P＜0.05);相比于空白對(duì)照組，免疫去勢(shì)和手術(shù)去勢(shì)均顯著上調(diào)了綿羊脾臟CD4、CD8、CD19、ER-β mRNA表達(dá)量(P＜0.05)，顯著下調(diào)AR mRNA表達(dá)量(P＜0.05)，而不影響ER-α基因mRNA表達(dá)(P＞0.05);上述基因在免疫去勢(shì)組和手術(shù)去勢(shì)組間無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　上述研究結(jié)果表明GnRH主動(dòng)免疫:1）能有效抑制睪丸的發(fā)育，降低血清睪酮濃度;2）顯著提高血