GnRH主動免疫對雄性藏綿羊甲狀腺功能的影響.pdf

1、20世紀60年代末期，激素免疫學的產(chǎn)生為動物生殖調(diào)控提供了新思路。用外源性GnRH主動免疫動物，會刺激動物機體產(chǎn)生大量GnRH特異性抗體，引起生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)平衡的失調(diào)，改變下丘腦-垂體-性腺軸間的正常反饋調(diào)節(jié)關系，以減少生殖激素的合成和分泌及終止配子的發(fā)生，從而達到免疫去勢的目的。GnRH主動免疫可避免外科閹割引起的動物高度應激、外科傷口容易感染，增加動物發(fā)病率甚至導致動物死亡等諸多不足，已成為最有望替代外科閹割的安全友好方法。本試驗用

2、蛋白結構修飾后的GnRH并列體二聚物（G6k-GnRH-Tandem-Dimer）與卵清蛋白偶聯(lián)，以Specol為佐劑，主動免疫雄性藏綿羊，以研究其對雄性藏綿羊甲狀腺功能的影響。
　　試驗選取24周齡、體重17-19 Kg的雄性藏綿羊30只，隨機分為三組，每組10只。其中一組于25周齡時各只綿羊頸部皮下注射2 mL GnRH并列體二聚物卵清蛋白復合物(TDK-OVA)的Specol乳化劑(含TDK100μg)，8周后加強免疫一次，

3、注射劑量及方法同初次免疫，為免疫去勢組。一組在試驗開始前一周進行外科手術去勢，為手術去勢組。剩余一組不做任何處理，為完整對照組。初次免疫當天記為0 wpv。初免當天及初免后第4、8、12、16 wpv（即每4周1次，直至屠宰）頸靜脈采集血樣，酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定血清抗體滴度及LH、FSH、T、TSH、T3、T4含量變化。加強免疫后8周（即16 wpv），屠宰所有試驗綿羊，分離下丘腦、垂體及兩側睪丸。Real-Time quant

4、itative PCR分析下丘腦、垂體生殖相關基因（GnRH-R、TSH-β、TRH、TSH-R、MT1、MT2、DIO2、DIO3）mRNA表達變化。結果顯示，免疫去勢組產(chǎn)生了良好的抗體反應，初免后機體產(chǎn)生抗體，加免后血清抗GnRH抗體滴度快速升高，由加免當天的18.67％升高到12周(12 wpv)的最高峰(55.62％)，后保持在較高水平，直至屠宰(48.85％)。與完整對照組相比，免疫去勢組血清T含量顯著下降(p＜0.05），屠

5、宰時仍維持在較低水平(4.27 ng/mL)。與完整對照組相比，手術去勢組和免疫去勢組血清T3和T4無顯著下降(p＞0.05），GnRH主動免疫顯著下調(diào)綿羊垂體GnRH-R、TSH-β及下丘腦TRH、TSH-R、DIO2mRNA表達水平（p＜0.05），而手術去勢組綿羊垂體GnRH-R mRNA表達水平顯著高于免疫去勢組和完整對照組(p＜0.05)。屠宰時，完整對照組睪丸平均重量為51.71±7.58 g，平均體積為49.04±6.66

6、 cm3，免疫去勢組睪丸平均重量為41.58±5.77 g，平均體積為39.91±6.02 cm3。與完整對照組相比，免疫去勢組藏綿羊睪丸發(fā)生萎縮，其重量及體積均下降到對照組睪丸的80％(p＜0.05)。
　　上述研究結果表明:GnRH主動免疫盡管使下丘腦TRH、TSH-R、DIO2、DIO3及垂體TSH-β mRNA表達水平下調(diào)，但對血清中TSH、T3及T4濃度無明顯影響?？傊珿nRH主動免疫對雄性藏綿羊甲狀腺功能無不利影響。