原位肝移植大鼠肝內(nèi)門-體分流量的變化及其意義.pdf

1、目的：測定原位肝移植大鼠移植肝肝內(nèi)門-體分流量和肝功能的變化，探討移植肝肝內(nèi)門-體分流量與移植肝功能的關(guān)系。 方法：健康清潔級封閉群雄性SD大鼠，分為供體組和受體組，采用簡化二袖套法建立大鼠原位肝移植模型(rat orthotopic liver transplantation model，ROLTM)。具體方法為門靜脈(PV)、膽總管原位吻合，其中門靜脈采用袖套法吻合，膽總管采用自制導(dǎo)管直接連接。供肝肝上下腔靜脈(SVC)結(jié)扎

2、，切除受體右腎，供肝肝下下腔靜脈(IVC)與受體右腎靜脈袖套式吻合。ROLTM模型共24只，分為移植后2h、4d、7d三組，每組8只。各組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行肝臟活體在體灌注。經(jīng)小隱靜脈插管連續(xù)灌注D-山梨醇2min后(10mmol/L,0.2ml/min)，同時(shí)取門靜脈和肝靜脈血各1.0ml，用酶分光光度法測定山梨醇濃度，計(jì)算肝內(nèi)門-體分流量。取肝靜脈血1ml測定肝功能指標(biāo)，包括TBIL，DBIL，AST，ALT，ALB，TP，LDH。然

3、后切取肝臟，常規(guī)石蠟切片，觀察光鏡下肝臟組織形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果：模型總成功率為58.5％(24/41)。其中，2h組成功率80％(8/10)，4d組成功率61.5％(8/13)，7d組成功率44.4％(8/18)。死亡原因主要為膽道并發(fā)癥(膽瘺、膽道梗阻)，術(shù)后感染(肺部感染、腹腔感染、刀口感染)，術(shù)后出血及門靜脈、下腔靜脈扭曲或栓塞。2h組、4d組、7d組肝內(nèi)門-體分流量分別為39.9％，52.3％，27.6％，組間差異顯著，

4、且均比正常大鼠明顯增高。2h組ALT、AST、TBIL、DBIL、LDH較正常大鼠升高，ALB、TP則較正常大鼠降低。4d組ALT、AST、TBIL、DBIL、LDH較正常大鼠明顯升高，而ALB、TP則明顯降低。且4d組ALT、AST、TBIL、LDH比2h組增高，ALB、TP則比2h組降低。7d組各項(xiàng)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。三組之間差異顯著。三組ROLTM肝內(nèi)門一體分流量與血生化指標(biāo)有明顯相關(guān)關(guān)系，與TP、ALB呈負(fù)相關(guān)，與ALT、AST

5、、LDH、TBIL、DBIL成正相關(guān)關(guān)系。 肉眼觀察，2h組大鼠肝臟顏色鮮紅，質(zhì)地柔軟，與正常大鼠肝臟相似；4d組大鼠肝臟明顯腫大，顏色略顯蒼白，質(zhì)地偏硬，但質(zhì)地均一；7d組大鼠肝臟顏色鮮紅，無明顯腫大，質(zhì)地亦柔軟，與正常肝臟基本相同。 光鏡下觀察，各組肝組織匯管區(qū)、中央靜脈、肝細(xì)胞索及肝竇結(jié)構(gòu)均有不同程度的改變。2小時(shí)組可見肝細(xì)胞水腫，部分肝細(xì)胞呈氣球樣變，部分肝細(xì)胞呈嗜酸性變，但無壞死細(xì)胞，肝細(xì)胞索排列整齊，肝竇和中

6、央靜脈內(nèi)可見紅細(xì)胞堆積和不同程度的炎性細(xì)胞浸潤。4d組可見肝細(xì)胞水腫，較多肝細(xì)胞呈氣球樣變或嗜酸樣變，偶可見小灶性壞死，少量肝細(xì)胞索排列紊亂，匯管區(qū)及中央靜脈的分布與相對位置有變化。7d組肝臟結(jié)構(gòu)基本正常，小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞無明顯變性及壞死，匯管區(qū)及中央靜脈結(jié)構(gòu)無明顯改變。 結(jié)論： 1.ROLTM大鼠移植肝血供恢復(fù)后即存在肝內(nèi)門-體分流，并隨時(shí)間推移分流量變化呈現(xiàn)先增加后減少的過程。 2.ROLTM大鼠門-體分