腺病毒介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染促進(jìn)人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨化的研究.pdf

1、目的：觀察腺病毒介導(dǎo)的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(BMP-2)基因轉(zhuǎn)染對(duì)人間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)成骨能力的影響。
　　 方法：從健康志愿者全骨髓中分離培養(yǎng)hMSCs，體外擴(kuò)增純化后隨機(jī)分為4組。①Ad-BMP-2組：培養(yǎng)液中加入BMP-2基因重組腺病毒(Ad-BMP-2，1×1010OPU/ml)孵育24h，之后換普通培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。②Ad-LacZ組：用半乳糖酐酶基因重組腺病毒(Ad-LacZ)替換Ad-BMP-2，其余處理與Ad-

2、BMP-2組相同。③陽性對(duì)照組：培養(yǎng)液中添加地塞米松、抗壞血酸和β-甘油磷酸鈉。④空白對(duì)照組：不給予特殊處理。各組細(xì)胞處理后2w，Von Kossa 染色檢測(cè)hMSCs中骨膠原結(jié)節(jié)形成；全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)培養(yǎng)上清堿性磷酸酶(ALP)活性。
　　 結(jié)果：經(jīng)多次換液傳代，hMSCs 呈均一梭形形態(tài)。處理后Ad-BMP-2組與陽性對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)逐漸趨于扁平，突起減少。Ad-LacZ組和空白對(duì)照組形態(tài)無明顯變化。Von Kossa染色