難治性癲癇患者認(rèn)知狀況的臨床分析及低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠認(rèn)知功能影響及機(jī)制的研究.pdf

1、癲癇是由各種原因引起的腦細(xì)胞群異常放電所致的發(fā)作性、暫時性的腦功能障礙綜合征。癲癇的核心內(nèi)容是發(fā)作，但近年來，癲癇對認(rèn)知功能的影響越來越引起研究學(xué)者的關(guān)注。資料顯示，約有30％～40％的癲癇患者伴有不同程度的認(rèn)知功能障礙，不僅嚴(yán)重影響了癲癇患者的生活質(zhì)量，也給患者家庭及社會帶來巨大的負(fù)擔(dān)和壓力。
　　 癲癇患者中約20％～30％為藥物難治性癲癇，長期反復(fù)、多類型頻繁的癲癇發(fā)作，使難治性癲癇患者認(rèn)知功能可能更易受到損害。難治性癲癇

2、患者的治療方法主要為手術(shù)，盡管手術(shù)治療可使癲癇發(fā)作得到控制，并因減少抗癲癇藥物的用量而使患者認(rèn)知功能獲得改善，但另一方面，手術(shù)本身又可能對認(rèn)知功能產(chǎn)生一定程度的損害。因此，重視難治性癲癇患者的認(rèn)知功能損害，了解其特點及相關(guān)的影響因素，手術(shù)前后客觀評價患者的認(rèn)知功能狀況，對評估手術(shù)的綜合療效，選擇合理的治療方案具有重要意義。
　　 隨著立體定向放射神經(jīng)外科的興起，伽瑪?shù)吨饾u成為不開顱治療顱內(nèi)病變的重要手段，目前已用于難治性癲癇的治

3、療。來自臨床及基礎(chǔ)研究的資料提示，亞壞死劑量的伽瑪?shù)墩丈淇稍诓粨p傷靶區(qū)組織功能的情況下發(fā)揮抗癲癇作用，但機(jī)理尚不明確，限制了伽瑪?shù)吨委煹倪M(jìn)一步優(yōu)化。能否借助微創(chuàng)的伽瑪?shù)秾Πd癇進(jìn)行治療，達(dá)到既能有效控制癲癇發(fā)作，又能避免對認(rèn)知的損害，甚至改善認(rèn)知功能，有待進(jìn)一步深入研究。
　　 目前認(rèn)為，癲癇患者的認(rèn)知功能障礙與多種因素有關(guān)，但確切的生物學(xué)機(jī)制仍不明了。N-甲基-D-天氡氨酸（NMDA）受體是離子型谷氨酸受體的一種亞型，因可介導(dǎo)C

4、a2+內(nèi)流而觸發(fā)不同形式的突觸可塑性過程，與學(xué)習(xí)和記憶過程密切相關(guān)。細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高，可通過鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶（CaMK）、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）等多種信號途徑使環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）磷酸化。CREB作為一種重要的核轉(zhuǎn)錄因子，可在基因轉(zhuǎn)錄水平對學(xué)習(xí)記憶進(jìn)行調(diào)控。有研究表明，NMDA受體、鈣內(nèi)流、信號通路相關(guān)蛋白的變化在癲癇的發(fā)生發(fā)展及持續(xù)過程中均發(fā)揮重要作用，但確切機(jī)制仍不清楚。伽瑪?shù)妒欠窨稍诳拱d癇的同時通過干

5、預(yù)相關(guān)生物分子的變化而發(fā)揮保護(hù)認(rèn)知功能的作用，有待深入探討。
　　 本研究一方面對難治性癲癇患者的認(rèn)知功能狀況及其影響因素進(jìn)行了分析，并評價了外科手術(shù)治療對癲癇患者認(rèn)知功能的影響；另一方面通過建立慢性癲癇大鼠模型，應(yīng)用低劑量伽瑪?shù)秾Υ笫笾掳B皮層進(jìn)行照射，對大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力進(jìn)行評測，并觀察癲癇大鼠皮層及海馬NMDA受體亞基、細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平、CREB信號通路蛋白表達(dá)的變化，以探討癲癇認(rèn)知功能障礙的生物學(xué)機(jī)制及低劑量伽瑪?shù)墩丈涞?/p>

6、干預(yù)作用。
　　 第一部分難治性癲癇患者認(rèn)知功能狀況及其影響因素的臨床分析
　　 目的：探索難治性癲癇患者認(rèn)知障礙的特點，分析多種因素對認(rèn)知功能的影響。
　　 方法：選取62例難治性癲癇患者及60名健康者，分別采用瑞文推理能力測驗（SPM）、艾森克人格問卷（EPQ）以及90項癥狀清單（SCL-90）對受試者的認(rèn)知、個性、心理狀況進(jìn)行評測，分析年齡、病程、發(fā)作情況等多種因素對難治性癲癇患者認(rèn)知功能的影響。
　

7、　 結(jié)論：
　　 1、大多難治性癲癇患者的認(rèn)知功能明顯受損，存在智力缺陷的患者比例明顯高于正常人群。
　　 2、難治性癲癇患者多伴有不同程度的心理障礙，不良的心理健康狀況對患者的認(rèn)知功能具有重要影響。
　　 3、起病年齡、病程、發(fā)作類型、發(fā)作頻率、發(fā)作持續(xù)時間、用藥種數(shù)是難治性癲癇認(rèn)知功能損害的重要危險因素。
　　 第二部分外科手術(shù)對難治性癲癇患者神經(jīng)心理及認(rèn)知功能的影響
　　 目的：探討外科手

8、術(shù)對難治性癲癇患者個性、心理及認(rèn)知狀況的影響。
　　 方法：選取30例手術(shù)治療的難治性癲癇患者，分別采用瑞文推理能力測驗（SPM）、艾森克人格問卷（EPQ）以及90項癥狀清單（SCL-90）對患者手術(shù)前后的認(rèn)知、個性、心理狀況進(jìn)行評測，評估手術(shù)的綜合療效。
　　 結(jié)論：
　　 1、外科手術(shù)仍是目前治療難治性癲癇的有效手段，可以比較滿意地控制癲癇發(fā)作。
　　 2、癲癇患者術(shù)后心理狀態(tài)得到不同程度的改善，部分

9、癲癇患者術(shù)后認(rèn)知功能得以改善，但仍有不少比例的患者術(shù)后認(rèn)知功能受到損害。
　　 3、左側(cè)手術(shù)、術(shù)前IQ分值較高、術(shù)后發(fā)作控制不佳的患者術(shù)后更易出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙，顳葉及非顳葉手術(shù)均可導(dǎo)致術(shù)后認(rèn)知障礙；術(shù)后發(fā)作控制良好，隨著術(shù)后時間的延長，患者的認(rèn)知功能可得到逐步改善。
　　 第三部分低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠癲癇發(fā)作及認(rèn)知功能的影響
　　 目的：觀察低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠的抗癲癇作用及對認(rèn)知功能的影響。

10、　　 方法：根據(jù)動物是否致癇及接受伽瑪?shù)墩丈?，?0只大鼠分為4組：①對照組；②伽瑪?shù)秾φ战M；③戊四氮（PTZ）組；④PTZ+伽瑪?shù)督M。大鼠按35mg/kg經(jīng)腹腔注射PTZ溶液制備癲癇動物模型，以雙側(cè)額葉為照射靶區(qū)對大鼠進(jìn)行低劑量伽瑪?shù)墩丈洌丈渲行膭┝繛?0Gy，觀察并記錄各組大鼠伽瑪?shù)墩丈淝?、后的癲癇發(fā)作情況及腦電圖變化。于伽瑪?shù)墩丈浜?2周，應(yīng)用跳臺及水迷宮對各組大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力進(jìn)行評測。
　　 結(jié)論：
　　

11、1、戊四氮致癇大鼠模型制備成功率較高，可造成癲癇大鼠學(xué)習(xí)和記憶功能的明顯受損，是研究癲癇認(rèn)知功能障礙的理想模型。
　　 2、低劑量伽瑪?shù)墩丈淇煽刂拼笫蟀d癇發(fā)作，并能改善癲癇對認(rèn)知功能的損害。
　　 第四部分低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠皮層及海馬NMDA受體亞基表達(dá)的影響
　　 目的：觀察低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠皮層及海馬NMDA受體亞基表達(dá)的影響。
　　 方法：根據(jù)動物是否致癇及接受伽瑪?shù)墩丈?，?0只大

12、鼠分為4組：①對照組；②伽瑪?shù)秾φ战M；③PTZ組；④PTZ+伽瑪?shù)督M。大鼠按35mg/kg經(jīng)腹腔注射PTZ溶液制備癲癇動物模型，以雙側(cè)額葉為照射靶區(qū)對大鼠進(jìn)行低劑量伽瑪?shù)墩丈?，照射中心劑量?0Gy，于伽瑪?shù)墩丈浜?2周，應(yīng)用跳臺及水迷宮對各組大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力進(jìn)行評測，后留取腦組織，分別利用免疫組化及免疫蛋白印跡法對大鼠皮層及海馬NMDA受體亞基NR1、NR2A和NR2B進(jìn)行檢測。
　　 結(jié)論：
　　 1、PTZ誘發(fā)大

13、鼠癲癇發(fā)作的機(jī)制可能與額葉皮層及海馬NR1、NR2A及NR2B亞單位蛋白的表達(dá)增強(qiáng)有關(guān)，這可能是導(dǎo)致癲癇后出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙的原因之一。
　　 2、低劑量伽瑪?shù)墩丈淇梢鸢d癇大鼠皮層及海馬NR1、NR2A和NR2B的表達(dá)的減少，這可能是伽瑪?shù)兑种瓢d癇發(fā)作和改善認(rèn)知功能的分子機(jī)制之一。
　　 第五部分低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠皮層及海馬神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+水平的影響
　　 目的：觀察低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠皮層及

14、海馬神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+水平的影響
　　 方法：根據(jù)動物是否致癇及接受伽瑪?shù)墩丈洌瑢?0只大鼠分為4組：①對照組；②伽瑪?shù)秾φ战M；③PTZ組；④PTZ+伽瑪?shù)督M。大鼠按35mg/kg經(jīng)腹腔注射PTZ溶液制備癲癇動物模型，以雙側(cè)額葉為照射靶區(qū)對大鼠進(jìn)行低劑量伽瑪?shù)墩丈洌丈渲行膭┝繛?0Gy，于伽瑪?shù)墩丈浜?2周，應(yīng)用跳臺及水迷宮對各組大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力進(jìn)行評測，后急性分離額葉及海馬神經(jīng)元，應(yīng)用共聚焦顯微鏡對神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)游離Ca2

15、+水平進(jìn)行檢測。
　　 結(jié)論：PTZ致癇大鼠額葉皮層及海馬神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)高Ca2+濃度可能參與了癲癇的發(fā)病及與認(rèn)知功能障礙有關(guān)，低劑量伽瑪?shù)犊赡芡ㄟ^影響神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變化而發(fā)揮抗癲癇和改善認(rèn)知功能的作用。
　　 第六部分低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠皮層及海馬CREB信號通路的影響
　　 目的：觀察低劑量伽瑪?shù)墩丈鋵Πd癇大鼠皮層及海馬CREB信號通路的影響
　　 方法：根據(jù)動物是否致癇及接受伽瑪?shù)墩丈洌?/p>

16、將60只大鼠分為4組：①對照組；②伽瑪?shù)秾φ战M；③PTZ組；④PTZ+伽瑪?shù)督M。大鼠按35mg/kg經(jīng)腹腔注射PTZ溶液制備癲癇動物模型，以雙側(cè)額葉為照射靶區(qū)對大鼠進(jìn)行低劑量伽瑪?shù)墩丈?，照射中心劑量?0Gy，于伽瑪?shù)墩丈浜?2周，應(yīng)用跳臺及水迷宮對各組大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力進(jìn)行評測，后留取腦組織，分別利用免疫組化及免疫蛋白印跡法對大鼠海馬及皮層CREB、α-CaMKⅡ、ERK1/2蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測。
　　 結(jié)論：
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