伽瑪?shù)吨委煷笫箫D葉癲癇對認知功能及海馬Toll-like受體4表達的影響.pdf

1、目的：通過對氯化鋰-匹羅卡品顳葉癲癇大鼠的伽瑪?shù)墩丈?，探討伽瑪?shù)犊拱B效果及對大鼠學習記憶能力的影響，以及伽瑪?shù)墩丈浜箫D葉癲癇大鼠海馬中TLR4蛋白的表達變化，以探討在其癲癇發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：根據(jù)動物是否致癇及接受伽瑪?shù)墩丈洌S機將健康成年SD雄性大鼠70只分為3組，①A組：(正常對照組)鹽水注射組，10只；②B組：(癲癇對照組)單純氯化鋰--匹羅卡品致癇大鼠，10只；③C組：30GY和50GY伽瑪?shù)墩丈渎然?匹羅卡品

2、致癇大鼠，40只。顳葉癲癇大鼠經(jīng)腹腔注射氯化鋰及匹羅卡品制備，以雙側(cè)海馬為照射靶區(qū)對大鼠進行伽瑪?shù)墩丈洌丈溥吘墑┝糠謩e為30GY和50GY，觀察并記錄各組大鼠伽瑪?shù)吨委熐?、后癲癇發(fā)作情況。于伽瑪?shù)墩丈浜?天和30天，應用Morris水迷宮對各組大鼠學習和記憶能力進行評測。后留取腦組織，分別利用免疫組化及免疫蛋白印跡法對TLR4在大鼠海馬組織中表達進行檢測。
　　結(jié)果：
　　1、伽瑪?shù)墩丈渎然?匹羅卡品癲癇大鼠雙側(cè)海馬后觀

3、察發(fā)現(xiàn)，隨觀察期的延長，兩個劑量組均可明顯減輕大鼠的癲癇發(fā)作的程度，發(fā)作次數(shù)亦不同程度的減少。其中50Gy照射后3周出現(xiàn)有統(tǒng)計學意義的發(fā)作減少(P<0.05)，而30Gy照射后4周發(fā)作減少才出現(xiàn)有統(tǒng)計學意義的差異(P<0.05)。
　　2、水迷宮實驗結(jié)果顯示，與正常對照組比較，癲癇對照組大鼠水迷宮尋找平臺逃避潛伏期時間顯著延長，游泳距離增加，穿越平臺的次數(shù)及在原平臺象限的游泳距離百分率減少(P<0.05)，提示癲癇組大鼠學習記憶能

4、力明顯下降；而與癲癇組相比，伽瑪?shù)吨委熃M(30Gy、50Gy)無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　3、利用免疫組織化學技術分別對各組大鼠海馬區(qū)TLR4蛋白表達進行研究顯示：TLR4蛋白主要表達在海馬CA3區(qū)錐體細胞胞漿內(nèi)，呈現(xiàn)棕黃色顆粒。與正常對組相比，癲癇對照組大鼠海馬TLR4蛋白表達明顯增強，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；與癲癇對照組相比，伽瑪?shù)吨委熃M(30Gy、50Gy)TLR4蛋白表達逐漸減少，具有時間劑量依賴性，差異

5、有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　利用免疫印跡實驗分別對各組大鼠海馬區(qū)TLR4蛋白表達進行檢測，結(jié)果顯示：癲癇對照組與正常對照組TLR4蛋白表達相對灰度值比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。伽瑪?shù)吨委熃M(30Gy、50Gy)與癲癇對照組TLR4蛋白表達相對灰度值比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，具有時間劑量依賴性(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、小劑量多次注射匹羅卡品制備顳葉癲癇大鼠成功率高，是研究顳葉癲

6、癇的理想模型。
　　2、在氯化鋰-匹羅卡品顳葉癲癇大鼠模型中，邊緣劑量30GY和50GY伽瑪?shù)墩丈渚梢钥刂瓢d癇發(fā)作，其療效具有一定的時間劑量依賴性。癲癇大鼠在水迷宮中記憶能力明顯下降，伽瑪?shù)墩丈浜蟠笫笳J知能力無明顯下降。
　　3、大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后，TLR4蛋白在癲癇組海馬CA3區(qū)細胞中表達較正常對照組大鼠明顯增加，伽瑪?shù)吨委熀蟀d癇組大鼠海馬CA3區(qū)細胞中表達逐漸減少，存在時間劑量依賴性，提示TLR4蛋白在癲癇的發(fā)病和抗癲