miR-711對SGC-7901細胞周期G1期的影響及機制研究.pdf

1、目的：在前期研究的基礎上，本課題主要研究miR-711對人胃癌細胞SGC-7901細胞周期的影響。
　　方法：體外培養(yǎng)SGC-7901細胞，將miR-711過表達載體（miR-711-mimics）、miR-711抑制表達載體（miR-711-inhibitor）及空質(zhì)粒（NC）轉(zhuǎn)染至SGC-7901細胞，即實驗分為四組：miR-711-mimics、miR-711-inhibitor、空質(zhì)粒組（NC）及空白對照組(Control

2、)。采用實時熒光定量PCR方法驗證轉(zhuǎn)染后各組中miR-711的表達情況，通過MTT、流式細胞學檢測，分析其與SGC-7901細胞周期的相關性，Western Blots檢測CyclinD1、CDK4蛋白表達的變化。
　　結(jié)果：將miR-711-mimics、miR-711-inhibitor及空質(zhì)粒組（NC）轉(zhuǎn)染至SGC-7901細胞中，轉(zhuǎn)染72小時后，通過熒光顯微鏡下計數(shù)，測得轉(zhuǎn)染效率達75％以上，qRT-PCR檢測實驗組中 m

3、iR-711的相對表達量，結(jié)果顯示 miR-711-mimics組、miR-711-inhibitors及NC組中的miR-711表達量分別是空白對照組的168.31倍、0.269倍、0.998倍；MTT實驗結(jié)果顯示，miR-711-mimics組細胞培養(yǎng)24h、48h、72h后，其細胞增殖抑制率隨著時間的延長而增加（P<0.05），miR-711-inhibitor組其細胞增殖抑制率隨著時間延長而降低（P<0.05），NC組與空白轉(zhuǎn)染

4、組比較無顯著性差異（P>0.05）；流式細胞術結(jié)果顯示miR-711-mimics組與其他3組相比較，轉(zhuǎn)染72h后的SGC-7901細胞顯著抑制在G1期（P<0.05）；Western Blot檢測顯示 miR-711-mimics組 CyclinD1、CDK4的表達量與其余組比較明顯降低（P<0.05）。
　　結(jié)論：miR-711能抑制人胃癌SGC-7901細胞增殖，其機制可能與下調(diào)CyclinD1、CDK4的表達，使細胞周期阻