地黃管食通口服液對(duì)食管癌細(xì)胞凋亡及Wnt通路β-catenin和c-myc的影響.pdf

1、目的：觀察地黃管食通口服液誘導(dǎo)人食管癌Eca109細(xì)胞及放療后模型大鼠食管癌細(xì)胞的凋亡作用并探討其分子機(jī)制。 方法：體外實(shí)驗(yàn)采用不同濃度的地黃管食通口服液直接作用于人食管癌細(xì)胞(Eca-109)，并使用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)、TUNEL及流式細(xì)胞術(shù)，觀察不同濃度的地黃管食通口服液對(duì)體外培養(yǎng)的Eca109細(xì)胞的生長(zhǎng)活力和細(xì)胞凋亡的影響。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)化學(xué)誘癌的大鼠模型，常規(guī)放療后采用不同濃度的地黃管食通口服液灌服模型動(dòng)物五周后，

2、探討該藥對(duì)放療后食管癌模型大鼠的影響，用TUNEL方法檢測(cè)該藥對(duì)食管癌細(xì)胞凋亡的影響，免疫組化檢測(cè)對(duì)β-catenin、c-myc的影響，Western-blot檢測(cè)Wnt通路的關(guān)鍵蛋白β-catenin的表達(dá)，RT-PCR檢測(cè)Wnt通路下游靶基因c-myc的變化。 結(jié)果：①地黃管食通口服液能抑制體外培養(yǎng)的人食管癌Eca109細(xì)胞生長(zhǎng)，這種作用呈時(shí)間、濃度依賴性增強(qiáng)。②地黃管食通口服液可以誘導(dǎo)Eca109細(xì)胞發(fā)生凋亡改變，隨著藥

3、物濃度的增加，凋亡指數(shù)增加，這種作用呈濃度依賴性，方差分析F值為158.35(p＜0.01)。③地黃管食通口服液體內(nèi)實(shí)驗(yàn)可以誘導(dǎo)食管癌放療后模型大鼠食管癌細(xì)胞凋亡，這種作用呈劑量依賴性，方差分析F值為133.95(p＜0.01)。④地黃管食通口服液治療后，各組食管組織胞漿、胞核β-catenin、c-myc蛋白的表達(dá)減弱。高劑量組與低劑量有顯著性差異(p＜0.05)，與空白組比較無(wú)顯著性差異(p＞0.05)。⑤地黃管食通口服液能顯著抑制

4、食管癌放療后大鼠食管癌細(xì)胞β-catenin的表達(dá)，方差分析F值為78.59(p＜0.01)；管食通高劑量組與低劑量組、六味組比較有顯著性差異(p＜0.05)，它還能下調(diào)c-myc基因的轉(zhuǎn)錄，方差分析F值為89.67(p＜0.01)，地黃管食通口服液高劑量能抑制c-mycmRNA的轉(zhuǎn)錄，與六味組有顯著性差異(p＜0.05)。 結(jié)論：地黃管食通口服液能體外抑制Eca109細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)Eca109細(xì)胞凋亡。這與我們課題組體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研