癲癇兒童外周血淋巴細(xì)胞CD19、CD20、CD4、CD8表達(dá)的研究.pdf

1、目的：
　　 癲癇(Epilepsy，EP)是多種原因引起大腦神經(jīng)元反復(fù)發(fā)作性異常放電引起的相應(yīng)的突發(fā)性和一過性腦功能障礙，是小兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central Nervous System，CNS)常見疾病之一。發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前尚未闡明。經(jīng)規(guī)范抗癲癇藥物治療仍有20％-30％患兒發(fā)作未能控制。
　　 國內(nèi)外研究證明癲癇與免疫有密切的關(guān)系，但機(jī)制未明。已有研究表明細(xì)胞因子IL-2，IL-6，TNF-a參與癲癇的發(fā)病，但對(duì)

2、直接影響體液免疫和細(xì)胞免疫功能的B、T淋巴細(xì)胞亞群與癲癇發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系的研究鮮有報(bào)道。
　　 自1977年P(guān)echadre等人首次提出免疫球蛋白可有抑制癲癇作用以來，陸續(xù)有學(xué)者臨床上應(yīng)用靜脈注射用人免疫球蛋白(Human Intravenous Immunoglobulin，IVIG)治療癲癇，結(jié)果發(fā)現(xiàn)IVIG對(duì)癲癇治療有效，但其治療癲癇的機(jī)制目前仍不清楚。
　　 本課題旨在通過測定癲癇兒童外周血淋巴細(xì)胞亞群CD19、

3、CD20、CD4、CD8的百分率及CD4/CD8比值，探討外周血T、B淋巴細(xì)胞亞群與癲癇發(fā)作的關(guān)系，尋找IVIG治療癲癇尤其是難治性癲癇的機(jī)制，為臨床應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)劑治療癲癇提供依據(jù)。
　　 方法：
　　 1、收集在本院兒童神經(jīng)?？谱≡旱陌d癇患兒80例，符合2005年國際抗癲癇聯(lián)盟(ILAE)關(guān)于癲癇的定義。年齡4個(gè)月～14歲，男51例，女29例。其中全身強(qiáng)直-陣攣性發(fā)作42例，失神發(fā)作11例，單純和復(fù)雜部分性發(fā)作19例，

4、嬰兒痙攣征7例，Landau-Kleffner綜合征1例。病史6天～2.5年。發(fā)作頻率：半年內(nèi)發(fā)作次數(shù)多于5次76例，少于或等于5次4例。
　　 2、將病例分為四組：A組(治療對(duì)照組，n=29)，B組(AEDs組，n=51)，C組(AEDs+IVIG組，n=49)，D組(IVIG組，n=12)，E組(正常對(duì)照組，n=30)。IVIG用量2g/kg，分3～5天靜脈滴注，均在用藥3～4周后復(fù)查淋巴細(xì)胞亞群。
　　 3、正常對(duì)

5、照組(E組)：為健康體檢兒童，男17例，女13例，年齡2歲～14歲，平均年齡6.50±2.08歲，本人及家族中均無過敏性疾病史。各組性別、年齡比無顯著性差異。
　　 4、入組標(biāo)準(zhǔn)：所有癲癇患兒抽血前一個(gè)月均無感染證據(jù)，無疫苗接種，未使用免疫增強(qiáng)或抑制藥物。非過敏性哮喘、過敏性鼻炎等過敏體質(zhì)者，非合并類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、過敏性紫癜等其他免疫性疾病者。
　　 5、影像學(xué)及腦電圖資料：腦電圖異常56例，正常13例；

6、頭顱MR異常27例，正常30例。
　　 6、標(biāo)本收集及檢測：收集各組兒童晨起空腹靜脈血2ml，于2小時(shí)內(nèi)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行外周血CD19、CD20、CD4、CD8淋巴細(xì)胞百分率及CD4/CD8比值的測定。
　　 結(jié)果：
　　 1、臨床療效判斷標(biāo)準(zhǔn)：參照1980年全國癲癇會(huì)議制定的標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)作完全停止為控制；發(fā)作頻率減少75％以上為顯效；發(fā)作頻率減少51％～75％為有效；減少26％～50％為效差；減少＜25％或次數(shù)不減

7、少或加重為無效[2]。本研究中癲癇兒童用AEDs+IVIG聯(lián)合治療有效率87.5％，單用AEDs治療有效率52.9％，兩者比較P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。IVIG治療組有效率83.3％，與AEDs組比較P=0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；IVIG治療組與AEDs+IVIG聯(lián)合治療組比較P＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、B淋巴細(xì)胞亞群：治療對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞CD19、CD20表達(dá)較正常對(duì)照組兒童明顯升高，各病例組CD19、

8、CD20表達(dá)均較正常對(duì)照組高。IVIG治療組及AEDs+IVIG聯(lián)合治療組均可使CD19、CD20表達(dá)下降，但均未能降至正常水平。IVIG組與AEDs+IVIG組CD19、CD20表達(dá)無顯著差異(P＞0.05)。AEDs組CD19、CD20表達(dá)與治療對(duì)照組比較無差異(P＞0.05)。
　　 3、T淋巴細(xì)胞亞群：治療對(duì)照組CD4表達(dá)、CD4/CD8比值較正常對(duì)照組表達(dá)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；IVIG治療組及AEDs+IVIG聯(lián)合治

9、療組均可使CD4表達(dá)上升，CD4/CD8比值升高，與治療對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。IVIG組與AEDs+IVIG組比較CD4表達(dá)，CD4/CD8比值無差異；治療對(duì)照組與AEDs治療組比較CD4表達(dá)，CD4/CD8比值無差異。
　　 4、腦電圖正常與異常組比較CD19、CD20、CD4、CD8的百分率及CD4/CD8比值均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 5、頭顱MR正常與異常組比較CD19、CD20、CD4、CD8的百分率及CD4/C

10、D8比值均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 6、癲癇治療效果與CD19、CD20治療前后的差值(降幅)呈正相關(guān)，與CD4、CD8治療前后的差值無相關(guān)。
　　 結(jié)論：
　　 1、癲癇患兒CD19、CD20表達(dá)升高，存在B細(xì)胞功能紊亂，下調(diào)CD19、CD20表達(dá)可使臨床發(fā)作減輕。癲癇治療效果與CD19、CD20治療前后的差值(降幅)呈正相關(guān)。
　　 2、癲癇兒童CD4T細(xì)胞功能紊亂，CD4表達(dá)下降，至CD4/CD8比值降