薜荔隱頭果原花色素提取物抗氧化活性研究.pdf

1、薜荔（Ficus pumila L.），是一種兼有食用、藥用和生態(tài)價值的常綠藤本。為合理利用薜荔隱頭果資源，本論文在優(yōu)化脫脂瘦果多酚提取、純化工藝的基礎(chǔ)上，對薜荔隱頭果多酚的化學(xué)組成進(jìn)行了初步鑒定，系統(tǒng)研究了薜荔隱頭果原花色素清除自由基和抗氧化活性。主要研究結(jié)果如下：
　　 采用GC-MS分析了薜荔瘦果種籽油中脂肪酸的組成，結(jié)果顯示種籽油中富含a-亞麻酸（54.44％）、亞油酸（23.14％）等不飽和脂肪酸。采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化

2、，獲得超聲輔助浸提薜荔脫脂瘦果多酚的最佳工藝條件：乙醇體積分?jǐn)?shù)70％、液固比37:1、提取溫度31℃。在此條件下測得的多酚提取率為4.82％，與理論預(yù)測值（4.91％）相比，相對誤差為1.87％。
　　 從5種國產(chǎn)大孔樹脂中，篩選出吸附量大、解吸率高的X-5樹脂，考察了該樹脂對薜荔脫脂瘦果多酚的吸附解吸性能。結(jié)果顯示，最佳吸附和解吸條件為：提取液初始質(zhì)量濃度約2.4 mg·mL-1、pH值在3.4～4.5間、吸附時間約6 h，以

3、體積分?jǐn)?shù)90％乙醇為洗脫劑、流速1.0 mL·min-1。在此條件下制備多酚提取物，其得率為3.12％，純度達(dá)71.49％，比脫脂瘦果中多酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)（4.82％）提高了近15倍?？梢姡琗-5樹脂適于富集薜荔隱頭果多酚，并可作為規(guī)模化生產(chǎn)的有效吸附劑。
　　 采用超聲輔助浸提-大孔樹脂吸附法工藝聯(lián)合制備了薜荔隱頭果不同部位（脫脂瘦果、花被和果托）的多酚提取物，對3種多酚提取物酸水解前后的紫外可見光譜和HPLC色譜圖進(jìn)行分析，推測提

4、取物很可能含有多種不同聚合度的原花色素類物質(zhì)；進(jìn)而采用LC-MS分析了提取物酸水解產(chǎn)物，初步推定為翠雀定（delphinidin），表明薜荔隱頭果原花色素主要結(jié)構(gòu)單元可能是原翠雀定（prodelphinidin）。
　　 在不同部位多酚提取物中，薜荔脫脂瘦果提取物中總酚、原花色素和黃烷醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)均最高，分別為714.86 TAE mg·g-1、466.57 CE mg·g-1和156.84 CE mg·g-1，其中原花色素占總酚

5、的65.30％。此外，脫脂瘦果多酚提取物得率亦最高，達(dá)3.12％。比較分析了不同部位原花色素提取物的體外抗氧化活性，結(jié)果顯示：在7種抗氧化體系中，薜荔脫脂瘦果原花色素均表現(xiàn)出最強(qiáng)的自由基清除能力和抗氧化活性，深入研究價值大，但從資源充分利用角度看，花被、果托也有一定的利用價值。
　　 以Sephadex LH-20為柱層析介質(zhì)純化薜荔脫脂瘦果原花色素，獲得FracⅠ、FracⅡ和FracⅢ3個級分，其中FracⅡ得率最高，占全部

6、級分的58.08％；各級分中以FracⅡ的總酚、黃烷醇和原花色素質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，分別達(dá)774.70TAE mg·g-1、191.09CEmg·g-1、552.33 CEmg·g-1，且比未分級前均有不同程度地提高，達(dá)到純化目的。
　　 以常用抗氧化劑BHT和Vc為陽性對照品，對3個級分純化物的抗氧化活性進(jìn)行比較研究，并分析了抗氧化活性與多酚類物質(zhì)之間的相關(guān)性，具體分述如下：
　　 各級分和對照品總抗氧化能力（FRAP值）從

7、大到小為：FracⅡ>Vc>FracⅢ≈BHT>FracⅠ，且總抗氧化能力與樣品中原花色素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的線性關(guān)系顯著（R2=0.9862）。
　　 不同級分對DPPH·和ABTS·+均表現(xiàn)出較強(qiáng)的清除作用，其中以FracⅡ的清除能力最強(qiáng)，其對DPPH·的半數(shù)清除濃度（PEC50）為0.062 mg·mL-1，清除ABTS·+的TEAC值為5.987 TE mmol·g-1；各樣品清除DPPH·能力的順序?yàn)椋篎racⅡ>FracⅢ>V

8、c>BHT>FracⅠ，而清除ABTS·+的強(qiáng)弱順序?yàn)椋篎racⅡ>Vc>FracⅢ>BHT>FracⅠ。相關(guān)性分析表明，清除DPPH·和ABTS·+自由基的主要活性成分為薜荔原花色素。
　　 不同級分對OH·和O2-·均有清除作用，其中以FracⅡ?qū)钚匝踝杂苫那宄芰ψ顝?qiáng)，其半數(shù)清除濃度（PEC50）分別為0.075 mg·mL-1、0.029 mg·mL-1；各樣品對OH·的清除能力順序?yàn)镕racⅡ>FracⅢ≈Frac

9、Ⅰ>Vc，清除O2-·能力的大小順序?yàn)镕racⅡ>Vc>FracⅢ>FracⅠ。相關(guān)性分析顯示，樣品對OH·的清除能力可能是低分子量多酚貢獻(xiàn)的，而原花色素和黃烷醇則為清除O2-·的主要活性成分。綜上所述，薜荔隱頭果原花色素具有很強(qiáng)的自由基清除能力，作為自由清除劑加以開發(fā)利用，潛力巨大。
　　 在β-胡蘿卜素/亞油酸和小鼠肝勻漿兩種脂質(zhì)體系中，3個級分亦表現(xiàn)出一定的抗脂質(zhì)過氧化作用，其中以FraeⅡ的活性較強(qiáng)，但均低于對照品BHT