裸腳菇屬菌產(chǎn)抗柑橘青、綠霉菌的活性物質的發(fā)酵工藝研究.pdf

1、江西是柑橘類水果的主要產(chǎn)區(qū)之一，青、綠霉菌是導致柑橘采后腐爛的主要病害，化學殺菌劑已產(chǎn)生環(huán)境殘留和病原抗藥性，生物源殺菌物的研究日益受到重視。本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)一株野生裸腳菇屬（Gymnopus sp.）菌株具有強烈抑制柑橘青、綠霉病害的活性，但缺乏該野生菌株營養(yǎng)生長需求和代謝產(chǎn)抑菌活性物質的基本資料，制約著對這一野生菌株資源的開發(fā)利用。
　　本文采用菌絲生長速率法和顯微觀察法測定了其抑菌活性，單因素試驗、Plackett-Bu

2、rman試驗設計、最陡爬坡試驗和Box-Behnken試驗響應面設計等優(yōu)化出液體培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件，經(jīng)有機溶劑萃取、硅膠柱層析和HPLC半制備分離純化抑菌活性物質。結果顯示：該祼腳菇屬菌發(fā)酵液對13種植物病原菌有抑制作用，抑制意大利青霉和指狀青霉的EC50值分別為69.25μg/mL和56.70μg/mL，對兩種菌菌絲的最小抑制濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MFC）均分別為200μg/mL和250μg/mL，遠小于陽性對照抑霉唑的MF

3、C500μg/mL，且對意大利青霉的菌絲造成了傷害作用。優(yōu)化液體搖瓶發(fā)酵工藝為：馬鈴薯280g/L，葡萄糖30g/L，麩皮8.25g/L，MgSO4·7H2O0.41g/L，KH2PO42g/L；維生素B1（VB1）3μg/mL，萘乙酸（NAA）和赤霉素（GA）分別為0.5μg/mL和2μg/mL；接種量為10%，裝液量100mL/250mL，溫度為28℃，初始pH為5.0，發(fā)酵周期為11d，優(yōu)化后發(fā)酵液抑菌活性從42.26%提高到55