玫瑰孢鏈霉菌產達托霉素發(fā)酵工藝研究.pdf

1、本論文采用單因素法、正交試驗法以及響應面法對達托霉素發(fā)酵條件及發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化，同時考察了補加葡萄糖以及氨基酸對達托霉素發(fā)酵的影響，結果如下:
　　 建立了測定發(fā)酵液中達托霉素含量的反相HPLC方法，色譜分析條件為:HypersilODS2（4.6mm×250mm，5μm）;流動相為含0.1％三氟乙酸的乙腈/含0.1％三氟乙酸的超純水(45/55，V/V);流速為1.0 ml/min;進樣量為20μl;檢測波長為220 nm

2、。
　　 以玫瑰孢鏈霉菌H11為達托霉素生產菌，通過搖瓶單因素試驗法對達托霉素發(fā)酵條件進行了優(yōu)化，確定了最佳發(fā)酵條件為:接種齡42 h，接種量2％，裝液量25 ml，溫度28℃，初始pH7.5。通過正交試驗法優(yōu)化了達托霉素發(fā)酵培養(yǎng)基，在此優(yōu)化的培養(yǎng)基及條件下，達托霉素的產量提高了107.99％。
　　 利用PB設計、最陡爬坡實驗、CCD實驗相結合的統(tǒng)計學方法對影響達托霉素發(fā)酵的培養(yǎng)基組分及主要外在條件進行了進一步的優(yōu)化和

3、評價，確定了達托霉素搖瓶最佳發(fā)酵條件，達托霉素產量的預測值為184.67 mg/L。發(fā)酵驗證試驗測得達托霉素的產量為191.99mg/L，與優(yōu)化前相比達托霉素產量提高了2.25倍，表明此方法對于優(yōu)化達托霉素發(fā)酵條件是一種可行、有效的方法。
　　 在搖瓶及2.5 L發(fā)酵罐中研究了補加葡萄糖對達托霉素發(fā)酵的影響。搖瓶發(fā)酵結果表明:初始葡萄糖為40 g/L時最佳;在對數(shù)生長期后期補加20 g/L的葡萄糖，達托霉素產量提高了39.77％

4、;在對數(shù)生長期和穩(wěn)定期分4次共補加20 g/L的葡萄糖，達托霉素產量提高了62.06％。2.5 L發(fā)酵罐補料分批發(fā)酵結果表明，從發(fā)酵12h開始共流加30g/L葡萄糖，不僅有效地延長了抗生素的合成期，而且提高了菌體合成抗生素的能力，最終使達托霉素的產量比分批發(fā)酵提高了1.39倍。
　　 研究了補加氨基酸對達托霉素發(fā)酵的影響，結果表明:L-Trp及L-Asp具有前體的作用，能夠刺激達托霉素的合成;在發(fā)酵初期添加1g/L的L-Trp使