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1、γ亞麻酸(γ-linolenic acid,GLA)是一種在生物體內(nèi)具有獨(dú)特生物活性的必需多烯不飽和脂肪酸。GLA在心腦血管系統(tǒng),呼吸系統(tǒng),肝臟,糖尿性精神病變和生殖系統(tǒng)具有非常重要的調(diào)節(jié)作用。目前已廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、飼料、化妝晶、生物轉(zhuǎn)化等領(lǐng)域。隨著人們對(duì)GLA生物活性認(rèn)識(shí)的不斷提高,市場(chǎng)需求日益增強(qiáng),GLA的天然來源已供不應(yīng)求,微生物發(fā)酵生產(chǎn)GLA以其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)已成為近年研究的熱點(diǎn),是一個(gè)潛力巨大的GLA新資源。本論文以刺孢小克
2、銀漢霉菌(Cunninghamella echinulata)Xmu-Lu-415為出發(fā)菌株,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)研究。
通過搖瓶實(shí)驗(yàn),初步確定發(fā)酵培養(yǎng)基。通過單因素實(shí)驗(yàn)分別就無機(jī)氮源、非離子表而活性劑、酵母粉及玉米漿對(duì)C.echinulata生長(zhǎng)和油脂積累的影響進(jìn)行了優(yōu)化,從而確定出C.echinulata發(fā)酵生產(chǎn)GLA的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成(g/L):葡萄糖80,酵母粉2.5,KH2PO43,MgSO4·7H2O3,NH4Cl3
3、,檸檬酸3,檸檬酸三鈉12,玉米漿5,FeSO40.02,CaCl20.02,CuSO40.0004,ZnSO40.002。
以搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基為對(duì)照,考查了維生素的添加對(duì)GLA積累量的影響。結(jié)果表明,VB12、泛酸鈣、肌醇、硫辛酸、煙酸、核黃素和生物素的添加有利于GLA的積累,VE、VB1、VB6和葉酸的添加則對(duì)GLA的積累有抑制作用,但對(duì)生物量和油脂含量沒有影響。
在優(yōu)化的培養(yǎng)基基礎(chǔ)上,繼續(xù)考察碳源、碳氮比
4、及金屬元素對(duì)GLA積累的影響。結(jié)果表明,最佳碳源為蔗糖,Mn2+、Fe2+、Zn2+三種金屬離子的最佳濃度均為20 mg/L,且當(dāng)碳氮比為35時(shí)可獲得最大GLA含量1351.8 mg/L。
同時(shí),考查碳源、碳氮比及金屬元素對(duì)C.echinulata油脂成分的影響,結(jié)果表明,油脂成分主要足棕櫚酸(Palmitic acid,PA)、硬脂酸(Stearic acid,SA)、油酸(Oleic acid,OA)、亞油酸(Lino
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