γ-亞麻酸生產(chǎn)菌株誘變選育的研究.pdf

1、f o r t h ed e g r e eo f —M a s t e r o f S c i e n c eB yY i l i n g S H E NS t r a i nS u p e r v i s o r ：P r o f ．H o n g g u i W A NA s s o c i a t e P r o f ．L o n gY UD e c ．2 0 0 8A B S T R A C TG a m m a —l i n

2、 o l e n i c a c i d ( G L A ) ，o n eo f t h eh u m a n n e c e s s a r y p o l y u n s a t u r a t e df a t t ya c i d ，h a sa t t r a c t e d g r e a ti n t e r e s td u e t oi t sd i s t i n c t i v ep h y s i o l o g

3、 i c a lf u n c t i o n s ．A m o n ga l lt h e m e t h o d s o f i t sp r o d u c t i o n s ，f e r m e n t a t i o nb y m i c r o o r g a n i s m w a sr a t h e rn o t i c e —a b l e ．T h i st h e s i ss t u d i e dt h e

4、s t r a i no f C u n n i n g h a m e l l ae l e g a n t s ，i n v e s t i g a t e dt h em u t a t i o nm e t h o d , l o w —e n e r g y i o ni m p l a n t a t i o n ，t h er e l a t i o n s h i pb e t w e e nm o r p h o l

5、o g ya n d f e r m e n t a t i o no f t h es t r a i n ．A f t e r s t u d y i n gt h em e t a b o l i s mo f G L A ，t h e m e t h o d o f r e s i s t i n gm a l e i c h y d r a -z i d ew h i c h c o u l db r e e d h i 曲-

6、 y i e l d i n gm u t a n t W a S m a d e s u r e ，a n d t h ec o m p o s i t i o n o fb r e e d i n g c u l t u r e w a s c o n f ' m u e d ：P D A + 6 0 0 m g ／L o f m a l e i c h y d r a z i d e ．A f t e rr e j u v

7、 e n a t i n g ，c u l t u r i n ga n df i l t r a t i n gt h eo r i g i n a ls t r a i no f C u n n i n g h a m e l l a e l e g a n t s ，w e s t u d i e d i t sc h a r a c t e ro f b e a r i n g t h ei r r a d i a t e d

8、w i t hU V U v p l u sL i C l ，l o w —e n e r g yi o n s ；c o u n t e d t h eb i o l o g i c a le f f e c t so f t h es t r a i n ；a n d c h o s e t h eh i 曲一y i e l d i n gm u t a n ts t r a i nn a m e d N 2 0 0 - 5w h

9、o s ey i e l do f G L A w a s b e e ni n c r e a s e db y 8 ．2 4 ％a St h eb e g i n n i n g C u n n i n g h a m e l l ae l e g a n t sw a i t i n g f o rf u r t h e ri r r a d i a t e dw i t hl o w —e n e r g yi o n s ．I

10、 nt h i sp a p e r , w e c h i e f l yd i s c u s s e d t h eb i o l o g i c a le f f e c t sa f t e ri m p l a n t i n gl o w —e n e r g y i o n si n t ot h eC u n n i n g h a m e l l a e l e g a n t s ．W e s t u d i e

11、d t h ei n t e r a c t i o nb e t w e e n l o w - e n e r g yi o n sa n d C u n n i n g h a m e l l a e l e g a n t sb y i r r a d i a t i o ni tw i t hd i f f e r e n te n e r g y , d o s e s ．T h e n w e c o m p a r e

12、d t h ed i f f e r e n tm u t a g e n i ce f f e c t so f C u n n i n g h a m e l l ae l e g a n t sw i t hi o n i m p l a n t a t i o n ．T h e r e s u l t ss h o w t h a tt h eC u n n i n g h a m e l l ae l e g a n t sb

13、 yi o ni m p l a n t a t i o n C a l la c h i e v e h i g h e r r a t eo f m u t a t i o n a n dw i d e m u t a t i o n a ls p e c t r u m ．T w o h i 曲y i e l d C u n n i n g h a m e l l ae l e g a n t sm u t a n ts t r

14、a i n s h a sb e e n b r e df r o m t h i s ．T h r o u g h1 0 K e V N + ，1 5 0 x 1 0 1 3 i o n s ／c m 2i m p l a n t i n g o ng a m m a ．1 i n o l e n i c a c i dp r o d u c i n g b a c t e r i a ，t w oh i 曲- y i e l d m

15、 u t a n ts t r a i n sn a m e d ( S ) N 10 K e V 3 ·3 —2a n d( S ) N 1 0 K e V 3 - 3 - 1 5 w e r eo b t a i n e d ．T h e y i e l do f G L A i si n c r e a s e d b y 2 4 ．4 6 ％a n d2 5 ．1 2 ％r e s p e c t i v e l y

16、．T h e r e s u l t s s h o w t h a tt h em u t a n t s t r a i n sh a v e h i 曲g e n e t i cs t a b i l i t y ．W h e n t h ei n o c u l a t i o nw a s 15 ％；p H W a S 6 ．5 ；t h ev o l u m e m e d i a w a s 10 0 m l ( 5 0

17、0 m lf l a s k ) ；t h ef e r m e n t a t i o nc o n d i t i o n w a s p e a n u t o i l2 ．0 ％，c i t r i ca c i d ／c i t r a t eO ．5 ％，F(xiàn) e S 0 4 0 ．01 ％，C u S 0 4 0 ．0 0 2 ％，M n S 0 4 0 ．0 0 2 ％，a n d t h ey i e l do f G

18、L A w a s 1 ．7 5 9 ／L ．T h e m y c e l i a l 衄w e i g h t a n dG L A p r o d u c t i v i t yo f t h em y c e l i a l p e l l e t w e r ea l w a y sl o w e r t h a nf i l a m e n t o u s m y c e l i u m ．S h o w s t h em