產(chǎn)抑菌活性物質(zhì)微生物的篩選、鑒定及抑菌活性研究.pdf

1、放線菌由于其代謝產(chǎn)物的多樣性，尤其是抗生素類(lèi)代謝產(chǎn)物在疾病治療中的應(yīng)用而備受關(guān)注，本文旨從不同生境中篩選分離放線菌，并對(duì)篩選獲得的放線菌的代謝產(chǎn)物進(jìn)行初步抗菌活性和細(xì)胞毒性研究。
　　本文對(duì)不同生態(tài)環(huán)境（土壤、海洋）采用相應(yīng)的篩選方法和分離培養(yǎng)基，并以50 ug/ml重鉻酸鉀等作為細(xì)菌、真菌抑制劑，共分離得到34株放線菌。實(shí)驗(yàn)中采用瓊脂塊擴(kuò)散對(duì)峙法對(duì)得到放線菌進(jìn)行初步篩選，最終選出3株具有一定抗菌活性的放線菌，通過(guò)分子生物學(xué)16S

2、 rDNA測(cè)序法對(duì)分離得到部分放線菌進(jìn)行測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果在NCBI網(wǎng)絡(luò)上進(jìn)行序列BLAST比對(duì)，結(jié)果顯示篩選到的這3株放線菌類(lèi)屬于分別屬于 Nocardia asteroides X1、Micromonospora inyonensis X2和Micromonospora agamiensis X3。對(duì)其中一株屬于星狀諾卡氏菌屬的菌株活性較好，并通過(guò)鑒定其分離地位命名為Nocardia asteroids X1。對(duì)Nocardia as

3、teroids X1進(jìn)行不同培養(yǎng)基配方發(fā)酵，以研究該菌胞外和胞內(nèi)的抑菌活性物質(zhì)的抑菌效果，結(jié)果表明：Nocardia asteroids X1胞外和胞內(nèi)物質(zhì)對(duì)Staphylococous，Bacillus和Candia Albicans都有一定的抑菌效果。
　　實(shí)驗(yàn)中除采用瓊脂塊對(duì)峙法測(cè)定所得放線菌對(duì)病原菌的抑菌活性，另運(yùn)用CCK-8法測(cè)定放線菌發(fā)酵粗產(chǎn)物對(duì)腫瘤細(xì)胞A549的毒性，結(jié)果得到3株具有抗菌活性的放線菌。
　　最后