綠色小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記的轉(zhuǎn)基因斑馬魚的構(gòu)建.pdf

1、小膠質(zhì)細(xì)胞(microglia)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)中固有的免疫細(xì)胞，同時在視網(wǎng)膜中起維持神經(jīng)元內(nèi)穩(wěn)態(tài)和免疫防御的作用。越來越多的實驗數(shù)據(jù)表明，小膠質(zhì)細(xì)胞的慢性激活與多種神經(jīng)退行性疾病有關(guān)，如阿爾茨海默病、帕金森病和多發(fā)性硬化等。在視網(wǎng)膜退行性疾病中，內(nèi)源性的刺激使小膠質(zhì)細(xì)胞迅速活化，產(chǎn)生一系列反應(yīng)，如細(xì)胞增殖，向損傷部位遷移以及具備更高的吞噬活性，小膠質(zhì)細(xì)胞還分泌多種細(xì)胞因子、趨化因子

2、和神經(jīng)毒性因子，行使神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)毒性雙重作用。
　　 近年來，斑馬魚作為新型動物模型已經(jīng)在發(fā)育生物學(xué)和基因功能研究領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。由于斑馬魚的中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有強(qiáng)大的自我修復(fù)能力，尤其是視網(wǎng)膜等神經(jīng)組織具有再生能力，斑馬魚成為人類神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究的理想動物模型。
　　 本研究中，我們首先克隆斑馬魚小膠質(zhì)細(xì)胞特異性表達(dá)基因progranulin-α的啟動子(～2.2kb)，將該啟動子序列克隆到To12轉(zhuǎn)座子EGFP基因