鐵莧菜總黃酮的提取純化及其抗氧化活性的研究.pdf

1、鐵莧菜（Acalypha australis L.）是一種在我國分布廣泛的大戟科一年生草本植物，是民間常用的藥材，具清熱解毒、止血、止痢等功效，其藥用價值和低廉的原料來源成本，具有一定的開發(fā)利用優(yōu)勢。隨著提取工藝和藥理活性不斷研究深入，鐵莧菜資源得到了一定的開發(fā)利用，在中藥市場占有一席之地，但是對鐵莧菜的活性成分和藥理作用的研究仍處于基礎(chǔ)階段。研究以鐵莧菜全草為研究對象，研究鐵莧菜總黃酮的堿提、醇提和微波輔助提取工藝，確定各提取工藝的最

2、佳參數(shù)。通過乙酸乙酯、正丁醇的萃取得到鐵莧菜黃酮的4個不同的組分，分別研究各個組分鐵莧菜黃酮的含量及各部位的體外抗氧化活性，得出乙酸乙酯部位的鐵莧菜黃酮有較強體外抗氧化活性。通過建立D-半乳糖小鼠衰老模型，進一步研究其體內(nèi)抗氧化活性。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1、以鐵莧菜總黃酮得率為指標，通過單因素實驗和正交實驗優(yōu)化，得出超聲輔助堿溶酸沉法提取鐵莧菜總黃酮的最佳工藝為:料液比1∶20，堿性提取液pH11，溫度60℃，酸沉pH2

3、.5，超聲提取時間90min;有機溶劑乙醇提取鐵莧菜總黃酮的最優(yōu)工藝為:料液比1∶50，乙醇體積濃度為50％，時間2h，提取溫度70℃;微波輔助乙醇提取鐵莧菜黃酮的最優(yōu)工藝參數(shù)為:料液比1∶40，乙醇體積濃度為50％，微波萃取3min，提取功率為280W。
　　2、經(jīng)過有機溶劑的液-液萃取，得到不同極性部位的黃酮，并考查聚酰胺樹脂對乙酸乙酯相鐵莧菜黃酮的吸附特性。靜態(tài)吸附實驗表明，當(dāng)鐵莧菜黃酮的吸附pH為4，上樣液濃度為1.25m

4、g/mL時，有較好的吸附率和解吸率，由靜態(tài)動力學(xué)過程考查得出，聚酰胺樹脂吸附鐵莧菜黃酮的類型為快速吸附型，聚酰胺樹脂能在60min之內(nèi)達到吸附平衡。通過Langmuir方程擬合吸附等溫方程，具較好擬合度，Langmuir:Ce/qe=0.0349Ce+0.023(R2=0.925)。當(dāng)上柱液流速為1.5mL/min，上柱液體積為30mL時，聚酰胺樹脂對鐵莧菜黃酮達到吸附飽和，最佳洗脫劑濃度為30％。
　　3、以VC為陽性對照，建立

5、不同的化學(xué)反應(yīng)體系，分別檢測鐵莧菜不同極性部位黃酮的總還原力，以及清除二苯代苦味酰基苯肼自由基(DPPH·)，超氧陰離子自由基(O2-·)和羥基自由基(·OH)的作用大小。結(jié)果表明，鐵莧菜不同極性部位黃酮在各反應(yīng)體系中還原力和清除作用均有不同，乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有良好的抗氧化作用，還原力分別達到0.726和0.644，超過抗壞血酸，其中乙酸乙酯對DPPH·和·OH的清除作用達到81.83％和88.83％，大于抗壞血酸，而醇提物和

6、極性較大水相的最大還原力和自由基清除作用與抗壞血酸相比，表現(xiàn)出較低的抗氧化能力。
　　4、選取體外抗氧化活性較高的乙酸乙酯相的鐵莧菜黃酮作為體內(nèi)抗氧化活性的研究對象，考查乙酸乙酯相中的鐵莧菜黃酮對D型半乳糖致昆明小鼠衰老的活性作用，試驗過程中，定期稱量小鼠體重，并檢測小鼠血清、心、肝、腎中丙二醛(MDA)的含量，以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)的活性，結(jié)果表明，與陰性對照組相比