蜂膠黃酮的提取及其抗氧化活性的研究.pdf

1、本文以蜂膠為原料，采用乙醇超聲波提取和超臨界二氧化碳萃取兩種方法提取蜂膠中的黃酮類化合物，并確定其最佳提取工藝和參數(shù)。采用氣質(zhì)、液相色譜、紫外分光光度計測定其黃酮成分及含量。采用二苯代苦味肼基(DPPH·)自由基分析法、油脂抗氧化法等五種方法測定蜂膠黃酮提取物的抗氧化性能。
　　 主要實驗結(jié)果如下：
　　 1、以蘆丁為標準品、采用AlCl3法測定總黃酮結(jié)果穩(wěn)定。在蘆丁0-0.2mg/mL濃度范圍內(nèi)線性較好，標準曲線方程為

2、Y=0.2936X+0.0025，其R2值為0.9997。五次重復(fù)測定的RSD值僅為1.222％;在五次加樣回收率試驗中，其平均加樣回收率達到103.33％,RSD值為1.8％。表明此法精密度高、重現(xiàn)性好且回收率較高。
　　 2、采用甲醇、乙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、三氯甲烷七種不同極性溶劑，提取蜂膠中黃酮類化合物的能力順序為：丙酮＞甲醇＞乙醇＞乙醚＞正丁醇＞乙酸乙酯＞三氯甲烷。其中乙醇的提取能力稍低于丙酮和甲醇，綜合考

3、慮成本與溶劑毒性，實驗選擇乙醇為提取溶劑。
　　 3、通過正交實驗表明乙醇超聲波提取蜂膠的最佳工藝條件為：采用15倍量的無水乙醇浸提蜂膠12hr，超聲提取3次，每次15min。
　　 4、通過對萃取壓力、溫度、時間、固液比、乙醇濃度的單因素實驗可知：超臨界CO2萃取的優(yōu)化工藝參數(shù)為：萃取壓力為25MPa，萃取溫度50℃，萃取時間3.5小時，固液比6:1，乙醇濃度100％。
　　 5、采用分光光度計法測得最佳工藝條

4、件下乙醇超聲波提取蜂膠總黃酮含量（以蘆丁計）為29.00％，超臨界CO2萃取蜂膠總黃酮含量（以蘆丁計）為15.21％。
　　 6、采用GC-MS頂空分析法對兩種方法得到的蜂膠提取物揮發(fā)組分進行化學(xué)成分及含量的分析，結(jié)果表明：兩種方法得到的蜂膠提取物在化學(xué)成分上存在差異。乙醇超聲波提取蜂膠中只含有黃酮類化合物柏木烯，含量為1.37％。蜂膠超臨界萃取物中含有1,8-桉葉油素、蘇合香烯、3-甲基2-丁烯酸乙酯、三甲基枯烯、柏木烯、芳樟

5、醇、柏木腦、乙位桉葉烯等黃酮化合物，其中1,8-桉葉油素含量較高，為2.2％。
　　 7、采用GC-MS固相微萃取對兩種方法得到的蜂膠提取物進行黃酮組分及含量的分析，結(jié)果表明，乙醇超聲波提取蜂膠中含有柏木烯、α-衣蘭油烯、愈創(chuàng)木烯、甲位桉葉烯、姜烯、ar-姜黃烯、香橙烯、去氫白菖烯、α-白菖考烯、大茴香醛、子丁香烯、巴倫西亞桔烯、香蘭素等黃酮類化合物，其中柏木烯、去氫白菖烯、子丁香烯含量較高。蜂膠超臨界萃取物中含有柏木烯、α-衣

6、蘭油烯、甲位桉葉烯、ar-姜黃烯、去氫白菖烯、α-桉葉油醇、桉葉油醇、乙位桉葉油醇、香蘭素、α-香柑油烯、乙位藿香烯、乙位桉葉烯、丁位杜松烯、白菖油萜、4-乙烯基兒茶酚等黃酮化合物，其中α-桉葉油醇、乙位桉葉油醇含量較高。
　　 8、以木犀草素、高良姜素、芹菜素、山奈酚、楊梅酮、柯因、蘆丁、桑色素、槲皮素九種黃酮為標準品，采用HPLC對兩種方法得到的蜂膠提取物進行黃酮組分及含量的分析，結(jié)果表明：蜂膠乙醇超聲波提取物中有7種與測試

7、標品相同成分的黃酮類化合物，7種黃酮類化合物總量為16.32％，其中高良姜素、柯因、槲皮素的含量較高，分別為4.91％、5.59％、4.01％。木犀草素、芹菜素、山奈酚的含量較少。蜂膠超臨界萃取物中只含有高良姜素1.71％、柯因1.46％。
　　 9、通過五種不同的體系(油脂抗氧化、DPPH、羥基自由基·OH、亞硝酸鹽(N02-)、還原能力）研究了兩種蜂膠黃酮提取物的抗氧化性能。結(jié)果表明：蜂膠乙醇超聲波提取物和超臨界萃取物在五種