實時熒光定量PCR及免疫組化檢測非小細胞肺癌中Survivin表達及意義.pdf

1、目的：建立實時熒光定量PCR檢測Survivin mRNA的方法。檢測Survivin蛋白和mRNA在肺癌組織及正常肺組織中的表達水平，探討肺癌組織中Survivin的表達及臨床意義。 方法：采用免疫組化技術(shù)和實時熒光定量PCR技術(shù)檢測40例非小細胞肺癌組織和20例正常肺組織中Survivin蛋白和mRNA表達情況，同時分析Survivin表達情況和臨床病理特征間的關(guān)系。SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析：免疫組化結(jié)果用X2檢

2、驗或Fisher確切概率法檢驗；實時熒光定量PCR結(jié)果兩個樣本均數(shù)間比較采用t檢驗，多個樣本均數(shù)間比較用方差分析；Kaplan-Meier法進行生存分析，生存曲線比較用Log-rank檢驗。 結(jié)果：1.免疫組化法結(jié)果：(1)Survivin在非小細胞肺癌中陽性率為67.5％高于正常肺組織中的5％(P=0.000)，差異有統(tǒng)計學意義。(2) Survivin在非小細胞肺癌患者中陽性率：①男性患者為62.5％，女性患者為75％(P=

3、0.408)，差異無統(tǒng)計學意義。②年齡<60歲患者為65.4％，≥60患者為71.4％(P=0.972)，差異無統(tǒng)計學意義；③鱗癌患者為66.7％，腺癌患者為68.8％，腺鱗癌66.7％(P=0.991)，差異無統(tǒng)計學意義；④高分化患者為71.4％、中分化患者為50％，低分化患者為69％(P=0.739)，差異無統(tǒng)計學意義；⑤腫瘤大小≤3cm患者為80％，>3cm患者為63.3％(P=0.599)，差異無統(tǒng)計學意義；⑥有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者為

4、68％，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為67.7％(P=0.931)，差異無統(tǒng)計學意義；⑦臨床為I期、II期、III期患者Survivin表達分別為75％、60％、66.7％(P=0.873)，差異無統(tǒng)計學意義；⑧近期有復發(fā)患者為83.3％，近期無復發(fā)患者為64.7％(P=0.643)，差異無統(tǒng)計學意義。(3)Survivin陽性組中位生存時間24個月，陰性組中位生存時間28個月(P=0.285)，差異無統(tǒng)計學意義。2.熒光定量PCR結(jié)果：(1)Surv

5、ivin mRNA在非小細胞肺癌中的表達為1.639±1.372，高于正常肺組織中的0.580±0.487(P=0.000)，差異有統(tǒng)計學意義。(2)Survivin mRNA在非小細胞肺癌患者中的表達：①男性患者表達1.605±1.521，女性患者為1.691±1.156(P=0.848)，差異無統(tǒng)計學意義；②年齡<60歲患者表達1.501±1.154，≥60患者為1.897±1.725(P=0.390)，差異無統(tǒng)計學意義；③鱗癌患者

6、表達1.613±1.807，腺癌患者為1.829±1.132，腺鱗癌1.413±1.224(P=0.737)，差異無統(tǒng)計學意義；④高分化患者表達1.120±0.730、中分化患者為1.450±0.472，低分化患者為1.765±1.554(P=0.616)，差異無統(tǒng)計學意義；⑤腫瘤大小≤3cm患者表達1.732±1.559，>3cm患者為1.609±1.333(P=0.809)，差異無統(tǒng)計學意義；⑥有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者表達1.671±1.5

7、17，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為1.587±1.137(P=0.855)，差異無統(tǒng)計學意義；⑦臨床為I期、II期、III期患者Survivin表達分別為1.609±1.214、1.747±1.584、1.600±1.423(P=0.962)，差異無統(tǒng)計學意義；⑧近期有復發(fā)患者表達為2.056±1.948，近期無復發(fā)患者為1.566±1.270(P=0.427)，差異無統(tǒng)計學意義。(3)Survivin mRNA高表達組中位生存時間22.5個月，低表