ABCE1在肺癌、癌旁組織及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中表達的RT-PCR及免疫組化法檢測.pdf

1、目的：
　　 肺癌是最常見的惡性腫瘤之一,肺癌的發(fā)病率和死亡率已躍居各類惡性腫瘤的前列,在歐美一些發(fā)達國家,肺癌的發(fā)病率和死亡率己成為各種癌癥之首。腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤(癌)的重要生物學(xué)特征。大多數(shù)癌癥患者并非死于原發(fā)癌,而是死于轉(zhuǎn)移性癌。因此,腫瘤轉(zhuǎn)移的研究是一個令人關(guān)注的重要課題。惡性腫瘤的發(fā)生是多基因參與并相互作用的多階段過程,腫瘤的轉(zhuǎn)移同樣是多因素多基因相互協(xié)調(diào)作用的多階段過程。近年來,隨著腫瘤分子生物學(xué)技術(shù)的進展,人們相

2、繼發(fā)現(xiàn)了nm23-H1、TIMP5、KAI1、MRP-1等轉(zhuǎn)移抑制基因,另外還發(fā)現(xiàn)了一些與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因,如CD44、c-erb B-2等。
　　 ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子E1(ATP-binding cassette transporter E1,ABCE1)于多細胞真核生物細胞胞漿內(nèi)編碼一種名為核糖核酸酶L(Ribonuclease L,RNaseL)抑制因子的68KD蛋白,而在細胞內(nèi)RNase L能特異性結(jié)合并降解RNA,因

3、此ABCE1蛋白通過對RNase L的抑制阻斷2-5A/RNase L通路,從而間接抑制了細胞的凋亡。目前ABCE1基因及其參與調(diào)節(jié)的2-5A/RNase L通路在某些惡性腫瘤的發(fā)生、進展等方面的作用也得到一些體現(xiàn)。因此我們有推測ABCE1參與肺癌的進展和轉(zhuǎn)移。本實驗就是通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)及免疫組化(SP)法檢測ABCE1基因在肺癌原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)與癌旁組織之間的表達差異,從而評價其在肺癌進展和轉(zhuǎn)移上的影響,

4、評價其臨床意義。
　　 方法
　　 本實驗采集18例臨床手術(shù)切除的不同肺葉或肺段人肺癌組織、癌旁組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)標本。標本于術(shù)后送大體病理學(xué)檢查后分割為兩部分,一部分立即置液氮內(nèi)速凍,-80℃貯存,用以RT-PCR方法檢測ABCE1基因mRNA表達差異；另一部分立即以10％中性福爾馬林浸泡固定,用以免疫組織化學(xué)實驗。
　　 結(jié)果
　　 RT-PCR實驗結(jié)果顯示:肺癌組織及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中ABCE1基因表達量高