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文檔簡介
1、[目的]
通過酶聯(lián)免疫吸附測定法(Enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)定量測定非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清中胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(Insulin-like growth factor binding protein7,IGFBP-7)的濃度,通過免疫組化化學技術(shù)(immunohistochenistry)測定IGFB
2、P-7在非小細胞肺癌腫瘤組織、癌旁組織和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織等中的表達情況,探討IGFBP-7與非小細胞肺癌發(fā)生、發(fā)展的關系及其在非小細胞肺癌的輔助診斷、危險性預測及治療中的臨床意義。
[方法]
1.病例入組標準
非小細胞肺癌組:選擇2014年02月至2014年12月在廣東醫(yī)學院附屬醫(yī)院心胸外住院手術(shù)治療的非小細胞肺癌患者59例,所有患者術(shù)前均未行化學藥物治療或者放射治療,術(shù)后均經(jīng)我院病理科明確診斷,有明確的組織
3、學依據(jù)。采用最新的國際抗癌聯(lián)盟(International Union Against Cancer,UICC)2009年肺癌TNM分期標準及世界衛(wèi)生與健康組織(World Health Organization,WHO)肺癌組織學分型標準分類。均有完整的臨床資料,并排除糖尿病、痛風等代謝性疾病。
肺部良性病變組:同期住院手術(shù)治療的肺部良性病變患者32例。所有患者術(shù)前均未行化學藥物治療,術(shù)后均經(jīng)我院病理科明確診斷,有明確的組織
4、學依據(jù),均有完整的臨床資料,并排除糖尿病、痛風等代謝性疾病。
2.標本采集方法
血清采集:所有病例均采集治療前晨起空腹外周靜脈血5約ml,室溫下靜置30分鐘后1000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘,吸取試管中上層血清分裝,置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。分批檢測。
肺組織、淋巴結(jié)采集:患者手術(shù)后立即取肺部腫瘤組織(部分),肺部癌旁組織(部分距離癌腫邊緣2cm處肺組織)、淋巴結(jié)(部分淋巴結(jié))、肺部良性腫塊(部分),標本置于4
5、0g/L甲醛液體中,4℃冰箱中存放24小時,然后實驗室中用石蠟包埋機進行石蠟包埋備用。成批檢測。
3.測定方法
血清中IGFBP-7表達水平的檢測:使用人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7ELISA試劑盒,按照試劑盒說明書的操作步驟分批測定肺癌組和肺部良性病變組血清中的IGFBP-7的濃度。
GFBP-7在肺部腫瘤組織、肺部癌旁組織、淋巴結(jié)、肺部良性腫塊中的檢測:采用免疫組化三步法進行檢測。采用Fromowitz綜
6、合計分法計分評定IGFBP-7的表達情況。
4.結(jié)果分析標準
采用SPSS20.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析,探討IGFBP-7與非小細胞肺癌發(fā)生、發(fā)展的關系及其在非小細胞肺癌的輔助診斷、危險性預測及治療中的臨床意義。
[結(jié)果]
1.ELISA法檢測血清中IGFBP-7濃度: IGFBP-7在肺部良性病變組血清中的平均濃度(44.71±17.92)ng/ml高于非小細胞肺癌組血清中的平均濃度(32.
7、37±14.35)ng/ml,差異有統(tǒng)計意義(P<0.05)。
2.免疫組化法染色測定IGFBP-7在不同組織中的表達強度:IGFBP-7在非小細胞肺癌腫瘤組織中的表達強度低于肺部良性病變組織中的表達強度,差異有統(tǒng)計學意義(31.05<40.17,P<0.05)。IGFBP-7在非小細胞肺癌腫瘤組織中的表達強度低于于癌旁組織中的表達強度,差異有統(tǒng)計學意義(31.05<37.73,P<0.05)。IGFBP-7在非小細胞肺癌癌旁
8、組織的表達強度與肺部良性病變組織中的表達強度差異無統(tǒng)計意義(37.73<40.17,P>0.05)。IGFBP-7在轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達強度低于未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達強度,差異有統(tǒng)計意義(30.11<41.65,P<0.05)。
3.IGFBP-7在非小細胞肺癌腫瘤組織、癌旁組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中表達強度與肺癌患者的年齡大小、性別差異、病史長短、有無吸煙史、有無家族肺癌病史等臨床參數(shù)之間的表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
9、r> 4.IGFBP-7在非小細胞肺癌腫瘤組織、癌旁組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中的表達與肺癌腫瘤所在部位、腫瘤的大小、腫瘤的病理類型、腫瘤病理組織學分型等參數(shù)之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。IGFBP-7在Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無遠處轉(zhuǎn)移非小細胞肺癌病例腫瘤組織、癌旁組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中的表達強度要大于在Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有遠處轉(zhuǎn)移的病例,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
5.非小細胞肺癌腫瘤組織、癌旁組織、轉(zhuǎn)移
10、淋巴結(jié)組織中IGFBP-7不同表達強度層次中的血清中IGFBP-7的濃度差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05);運用關聯(lián)統(tǒng)計量分析表明:兩兩皆為正相關,IGFBP-7在腫瘤組織、癌旁組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中的表達強度與血清中的濃度具有一定一致性。
[結(jié)論]
1.IGFBP-7在非小細胞肺癌患者血清、腫瘤組織和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中的表達隨著UICC分期、局部侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移等危險因素的增加而降低。
2.檢測非
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