抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎患者血漿MicroRNA-140表達(dá)的初步研究.pdf

1、背景與目的:
　　抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎（Anti-N-methyl-D-aspartate Receptor Encephalitis）是一種自身免疫性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，可伴或不伴卵巢畸胎瘤;隸屬副腫瘤性疾病范疇。臨床上可有前驅(qū)期，出現(xiàn)持續(xù)不規(guī)律高熱、頭痛、流感樣癥狀;明顯的精神癥狀，包括焦慮，激越，行為怪異，幻覺，妄想，思維混亂，失眠，語(yǔ)言障礙及厭食或攝食過度表現(xiàn);記憶力下降、意識(shí)水平下降、癲癇發(fā)作、運(yùn)動(dòng)功能障

2、礙和自主神經(jīng)功能紊亂。腦電圖可呈特異性“δ刷”，腦脊液或血清抗NMDAR抗體檢測(cè)被認(rèn)為是診斷該疾病的特異性抗體?？筃MDA受體腦炎可發(fā)病于任何年齡，以兒童和女性多見;女性發(fā)病的中位數(shù)年齡為23歲，而卵巢畸胎瘤的檢出與年齡具有相關(guān)性，大于18歲女性56％有單側(cè)或雙側(cè)卵巢畸胎瘤，而小于14歲的女孩則只有不到9％;臨床數(shù)據(jù)證實(shí)早期治療有效，早期診斷、早期免疫抑制劑治療以及伴腫瘤患者施行腫瘤切除對(duì)疾病的預(yù)后是積極的。但是該腦炎發(fā)病機(jī)制未明，目前

3、無(wú)確診“金標(biāo)準(zhǔn)”，且該疾病臨床表現(xiàn)個(gè)體異質(zhì)性較大，診斷較困難，臨床癥狀范圍廣，具有潛在的致死風(fēng)險(xiǎn)。因此需要進(jìn)一步研究，尋找確診該疾病的穩(wěn)定、準(zhǔn)確率高、靈敏性高的診斷標(biāo)志物。
　　MicroRNAs(miRNAs)是一類高保守性、非編碼dxRNA分子，長(zhǎng)度約22個(gè)核苷酸，通過與靶基因3'端非翻譯區(qū)(3'.UTR)的不完全堿基配對(duì)導(dǎo)致靶mRNA降解或翻譯抑制，從而在真核生物中對(duì)基因表達(dá)起著負(fù)調(diào)控作用。循環(huán)中MicroRNAs被包裹在外

4、泌體、微小體或凋亡小體中，這些膜性結(jié)構(gòu)對(duì)MicroRNAs起有效的保護(hù)作用。另外對(duì)于MicroRNAs的化學(xué)修飾、與蛋白分子或脂質(zhì)的結(jié)合也使得MicroRNAs具有抵抗RNase的能力，這些都提示MicroRNAs成為一種潛在性診斷標(biāo)志物。因此探討抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎患者血漿中MicroRNAs差異表達(dá)變化，尋找具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的MicroRNA，并依此為主線研究可能存在的作為輔助抗NMDA受體腦炎診斷的潛在的診斷標(biāo)志物。

5、r>　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)分2部分。(1)應(yīng)用微陣列基因芯片技術(shù)檢測(cè)抗NMDA受體腦炎患者和健康人血漿MicroRNAs的表達(dá)水平;篩選出具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異表達(dá)的MicroRNAs;(2)根據(jù)基因芯片結(jié)果、文獻(xiàn)資料，選擇MicroRNA-140作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，收集不同顱內(nèi)感染患者血漿，分為4組:健康人組、抗NMDA受體腦炎患者組結(jié)核性腦（膜）炎患者組、病毒性腦（膜）炎患者組，通過實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)各組血漿MicroRNA-140

6、的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.芯片結(jié)果共篩選出140個(gè)與抗NMDA受體腦炎相關(guān)的差異表達(dá)miRNAs基因(P＜0.01):53個(gè)表達(dá)上調(diào)，87個(gè)表達(dá)下調(diào)。其中MicroRNA-140表達(dá)在抗NMDA受體腦炎中表達(dá)下調(diào)5倍以上（|log2|=5.11，P=0.004）;
　　2.血漿MicroRNA-140的表達(dá)水平在抗NMDA受體腦炎患者組中顯著低于結(jié)核性腦（膜）炎患者組、病毒性腦（膜）炎患者組、健康人組(P＜0.