豨薟草中抗糖尿病成分的研究.pdf

1、近年來,隨著Ⅱ型糖尿病患者不斷增多,并且呈低齡化的趨勢,國內(nèi)外對糖尿病的治療都在積極的研究中,而蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的抑制劑作為治療糖尿病的潛在藥物,是治療糖尿病的重要靶點(diǎn)之一,并且對其的關(guān)注度逐漸提升。所以,從天然中草藥中篩選蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制劑的活性因子,對糖尿病的治療以及臨床應(yīng)用有著良好的前景。
　　 本課題采用Toepfer法從富鉻酵母中提取得到的基準(zhǔn)物富鉻酵母(LMWCr),通過紫外掃描光譜和薄層層

2、析證明基準(zhǔn)物已經(jīng)成功制得。
　　 從豬血中提取的粗酶(蛋白酪氨酸磷酸酶),通過丙酮沉淀,硫酸銨鹽溶鹽析等方法使其部分純化。結(jié)果表明:硫酸銨飽和度為90％透析酶的比活力為435U/mg,是粗酶比活力的3.37倍。酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)測得該酶的最適溫度和pH分別為38℃和7.0其Km值是4.01mmol/L。
　　 通過對豨薟草的提取和分離得到石油醚組分,乙酸乙酯組分和正丁醇組分,它們的提取率分別為1.14%,1.27%和1.59%

3、。酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果顯示:豨薟草石油醚組分和豨薟草乙酸乙酯組分是PTP1B的優(yōu)良競爭性抑制劑。它們的抑制活性約為同濃度基準(zhǔn)物(LMWCr)的1.83倍和3.43倍,IC50分別為0.40mg/mL和0.48mg/mL,Ki分別為5.227 mg/mL和2.384mg/mL。
　　 石油醚相通過反復(fù)柱層析得到一個(gè)活性成分經(jīng)IR,1H/13C-NMR、MS等波譜分析確定化學(xué)結(jié)構(gòu)為對映-16β,17-二羥基一貝殼19-羧酸。乙酸乙酯