神經(jīng)病理性疼痛大鼠大麻素Ⅱ型受體介導(dǎo)的抗傷害作用及受體表達(dá)的研究.pdf

1、[背景]神經(jīng)病理性疼痛(Neuropathic Pain)是由于神經(jīng)系統(tǒng)的原發(fā)損傷或功能障礙而引起的疼痛。目前發(fā)病機(jī)制不清，藥物治療效果不佳，缺乏有效的治療措施，是困擾臨床的一個(gè)挑戰(zhàn)性課題。造成這種結(jié)局的一個(gè)重要原因是治療神經(jīng)病理性疼痛的藥物的副作用尤其是其中樞神經(jīng)系統(tǒng)副作用限制了藥物的劑量，從而不能達(dá)到有效的鎮(zhèn)痛和治療作用。因而，探尋神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)病機(jī)制，尋求作用于脊髓或外周部位、不具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)副作用的藥物，顯得尤為迫切。CB

2、2大麻素受體主要表達(dá)于外周免疫細(xì)胞，有研究表明CB2受體選擇性激動(dòng)劑能夠抑制急性、炎性疼痛而不產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)副作用，但對(duì)于其在神經(jīng)病理性疼痛中的作用研究較少，同時(shí)對(duì)于CB2受體是否表達(dá)于脊髓和背根神經(jīng)節(jié)(DRG)，存在不同的報(bào)道，這些均需進(jìn)一步驗(yàn)證。 [目的]觀察選擇性CB2受體激動(dòng)劑AM1241對(duì)神經(jīng)病理性疼痛的效果；并檢測(cè)神經(jīng)病理性疼痛形成過(guò)程中脊髓背角、DRG部位CB2受體表達(dá)的變化，探討其治療作用的分子機(jī)制。

3、[方法]第一部分雄性S-D大鼠36只，隨機(jī)分為6組(n=6)：①CCI+安慰劑組，坐骨神經(jīng)慢性緊縮模型(CCI)建立后10天(下同)，腹腔注射安慰劑；②CCI+AM1241低劑量組，腹腔注射AM1241，劑量為100 μg/kg；③CCI+AM1241中劑量組，AM1241劑量為300 μ g/kg； ④CCI+AM1241高劑量組，AM1241劑量為1000 μ g/kg；⑤CCI+AM1241高劑量+AM630組，腹腔注射AM1

4、241和選擇性CB2受體拮抗劑AM630，劑量分別為1000 μg/kg和300 μg/kg；⑥CCI+AM1241高劑量+AM251組，腹腔注射AM1241和選擇性CB1受體拮抗劑AM251，劑量分別為1000μg/kg和300μg/kg。CCI模型采用慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎的方法建立。坐骨神經(jīng)結(jié)扎前后以及藥物治療前后，分別用vonFrey纖毛刺激針測(cè)量機(jī)械性痛閾。第二部分雄性S-D大鼠42只，隨機(jī)分為7組(n=6)：①Con組，對(duì)照組；②

5、S3組，假手術(shù)術(shù)后3天組；⑧C3組，CCI術(shù)后3天組；④S7組，假手術(shù)術(shù)后7天組；⑤C7組，CCI術(shù)后7天組；⑥SD14組，假手術(shù)術(shù)后14天組；⑦C14組，CCI術(shù)后14天組。CCI模型采用慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎的方法建立，假手術(shù)組僅顯露坐骨神經(jīng)，并不進(jìn)行結(jié)扎。用von Frey纖毛刺激針測(cè)量各組大鼠機(jī)械性痛閾后處死大鼠，取手術(shù)側(cè)腰膨大脊髓背角和L4、L5背根神經(jīng)節(jié)標(biāo)本，采用免疫蛋白印跡技術(shù)，從蛋白質(zhì)水平研究神經(jīng)病理性疼痛形成過(guò)程中CB2受體

6、表達(dá)的變化。 [結(jié)果]CCI導(dǎo)致手術(shù)側(cè)后爪的機(jī)械痛閾閾值降低(P<0.05)；AM1241劑量依賴性地抑制CCI引起的機(jī)械異常痛敏(P<0.05)；AM1241的作用可完全為選擇性CB2受體拮抗劑AM630所阻斷(P<0.05)，而不受選擇性CB1受體拮抗劑AM251的影響(P>0.05)。各組大鼠脊髓和背根神經(jīng)節(jié)部位均有CB2受體的表達(dá)；與對(duì)照組相比，CCI后7天、14天組脊髓背角CB2受體均發(fā)生上調(diào)(P<0.05)，CCI后