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文檔簡介
1、目的:探討CSF-1反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染卵巢癌SKOV3細(xì)胞干擾其基因表達(dá)及抑制細(xì)胞增殖的作用。
方法:合成CSF-1的反義寡核苷酸,用X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent轉(zhuǎn)染入卵巢癌SKOV3細(xì)胞中。實(shí)驗(yàn)分為四組:實(shí)驗(yàn)組即反義組(SKOV3細(xì)胞+轉(zhuǎn)染試劑+反義寡核苷酸)、錯義組(SKOV3細(xì)胞+轉(zhuǎn)染試劑+錯義寡核苷酸)、陰性對照組(SKOV3細(xì)胞+轉(zhuǎn)染試劑)、空白對照組(SKOV3細(xì)胞不做
2、任何處理)。采用RT-PCR和Western blotting檢測各組細(xì)胞處理后CSF-1mRNA和蛋白表達(dá)水平,通過MTT法檢測各組細(xì)胞處理后細(xì)胞增殖的抑制情況。
結(jié)果:應(yīng)用CSF-1反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染卵巢癌SKOV3細(xì)胞后,實(shí)驗(yàn)組的CSF-1mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯降低,細(xì)胞增殖也明顯受到抑制,與其他三組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組基因沉默效率為62.8%,蛋白抑制率為55.6%,細(xì)胞增殖抑制率為57.
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