反義Survivin寡核苷酸逆轉(zhuǎn)人卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、四川大學(xué)博士學(xué)位論文反義Survivin寡核苷酸逆轉(zhuǎn)人卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥的實(shí)驗(yàn)研究姓名：錢曉蕾申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：彭芝蘭20040416結(jié)果:1.人卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞株COCIDDP中Survivin的蛋白表達(dá)高于敏感細(xì)胞株COCl約2倍同時(shí)隨順鉑濃度增高表現(xiàn)不同特點(diǎn)，COC1細(xì)胞順鉑作用后升高迅速為15.43，是作用前3倍，而COCIDDP細(xì)胞升高平緩，幅度較低。2，大劑量順鉑作用于COC1和COCIDDP細(xì)胞

2、后，Survivin的蛋白表達(dá)和mRNA均下降直至消失。3.反義Survivin寡核昔酸作用COCIDDP細(xì)胞后Survivin蛋白表達(dá)被抑制約50%SurvivinmRNA被抑制約8.9倍4.COC1細(xì)胞和COCIDDP細(xì)胞在不同濃度順鉑作用24小時(shí)后，隨著濃度的升高。調(diào)亡指數(shù)逐步升高COCI細(xì)胞中S期和G2M期細(xì)胞所占的比例逐步下降，G.期細(xì)胞比例明顯增多，COC1DDP細(xì)胞中以G.期細(xì)胞減少的比例最高，G2M期細(xì)胞所占比例明顯增高

3、，S期細(xì)胞變化差異不大COC1DDP細(xì)胞轉(zhuǎn)染survivin反義寡核昔酸后，24小時(shí)凋亡為59.7%S期細(xì)胞比例明顯升高，由轉(zhuǎn)染前的40%上升至轉(zhuǎn)染后的50.8%G2期由5.2%上升至9.6%，而G期由54.8%下降至39.6%5.梯度順鉑作用后，COC1和COCIDDP細(xì)胞的抑制率逐步增高，以COCI細(xì)胞增高明顯，轉(zhuǎn)染協(xié)同0.1xPPC0.5xPPC和I.Oxppc順鉑作用后COC1DDP細(xì)胞株的抑制率分別為32.04%41.6%和7

4、2.1，比COC1細(xì)胞在相同濃度順鉑作用后的抑制率27.2%.36.07%和48.09%明顯要高6.卵巢癌coca細(xì)胞和COC1DDP細(xì)胞在順鉑作用后，隨著順鉑濃度的增加，caspase3活性亦相應(yīng)增加，呈劑量依賴關(guān)系，COC1細(xì)胞caspase3活性較COClDDP細(xì)胞增加明顯，以反義Survivin寡核昔酸封閉Survivin基因的表達(dá)可以導(dǎo)致COClDDP細(xì)胞Caspase3的激活7.COCI細(xì)胞中P53表達(dá)明顯高于COC1DDP