AQP5在手汗癥合并腋窩多汗患者腋窩汗腺的表達(dá)定位及人汗腺細(xì)胞體外模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　檢測多汗癥患者腋窩汗腺水通道蛋白5(aquaporin5,AQP5)的表達(dá)與定位,并通過建立人體汗腺細(xì)胞體外模型的實(shí)驗(yàn)研究,探討其與多汗癥發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。
　　方法:
　　收集手汗癥合并腋窩中重度多汗患者(實(shí)驗(yàn)組)及非多汗患者(對照組)腋窩皮膚及血清標(biāo)本,HE染色及透射電鏡觀察兩組間形態(tài)學(xué)差異,并電鏡下計(jì)數(shù)汗腺細(xì)胞分泌顆粒,免疫組化、熒光定量PCR及Western-blot法檢測AQP5表達(dá)。
　　酶

2、消化法培養(yǎng)兩組汗腺細(xì)胞,通過細(xì)胞免疫化學(xué)法鑒定細(xì)胞,并比較兩組細(xì)胞生長趨勢及AP5表達(dá);Elisa法檢測兩組血清乙酰膽堿濃度,并按照測得兩組濃度配制培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),通過免疫熒光法及Western-blot法檢測汗腺細(xì)胞AQP5表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　兩組間在病理形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)上未見明顯差異;實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞分泌顆粒顯著高于對照組,且AQP5mRNA及蛋白表達(dá)量顯著高于對照組;培養(yǎng)的汗腺細(xì)胞抗-CK7,抗-CK19染色陽性,抗

3、-Actin染色陰性,兩組細(xì)胞生長趨勢接近;實(shí)驗(yàn)組AQP5mRNA表達(dá)量高于對照組(P<0.05),而蛋白表達(dá)無明顯差異(P>0.05);
　　實(shí)驗(yàn)組外周血乙酰膽堿濃度高于對照組(P<0.05);按照測得濃度配制培養(yǎng)液培養(yǎng)汗腺細(xì)胞,6h后高濃度培養(yǎng)液汗腺細(xì)胞AQP5表達(dá)強(qiáng)度明顯高于低濃度組(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　手汗癥合并腋窩多汗者腋窩汗腺與非多汗癥者相比在形態(tài)學(xué)上無差異,但分泌顆粒增多,AQP5mRNA及