GnRH拮抗劑和雌激素聯(lián)合應(yīng)用預(yù)防順鉑所致小鼠卵巢損害的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、在過去二十年間，由于癌癥治療技術(shù)的不斷提高及支持治療的發(fā)展，許多惡性腫瘤患者的生存率顯著提高，其中，有些甚至達(dá)80％-90％。對于這些腫瘤幸存者來說，他們在享受疾病被控制，生命得以延續(xù)的同時，不得不面臨由于治療腫瘤所帶來的各種副反應(yīng)，甚至是長期的痛苦。如腫瘤患者常采用高劑量化療，可導(dǎo)致生殖功能喪失。這種損害有些是一部分卵巢功能喪失，有些則是完全喪失卵巢功能。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)在抗腫瘤治療成功后有70-80％發(fā)生了不孕及卵巢功能早衰等卵巢功

2、能受損癥狀。在這些年輕女性，卵巢功能喪失不僅僅是生殖功能的喪失，也伴隨內(nèi)分泌功能喪失，出現(xiàn)一系列內(nèi)分泌激素缺乏的癥狀，包括血管舒縮癥狀、陰道干燥、骨礦物質(zhì)的丟失甚或骨折。這些痛苦長期困繞著她們，嚴(yán)重影響她們的生活質(zhì)量和自信心，部分患者甚至因此出現(xiàn)了婚姻破裂或自殺。
　　 順鉑是一種廣譜抗腫瘤制劑，被廣泛應(yīng)用于多種惡性腫瘤治療，如睪丸、卵巢、膀胱、宮頸、頭頸、乳腺等部位的腫瘤，也應(yīng)用于小細(xì)胞或非小細(xì)胞型肺癌，在療效值得肯定的同時，

3、卻引起卵巢功能受損的嚴(yán)重副反應(yīng)。研究表明，在齲齒類動物，順鉑可致卵巢功能損害，如可增加卵泡細(xì)胞的凋亡、減少血清中的抗苗勒管激素(AMH)、影響動情周期、減少AMH相關(guān)的卵泡的數(shù)量。在人類，順鉑可通過多種機(jī)制引起卵巢功能早衰。
　　 所以探索更新更好的措施來保護(hù)化療中的卵巢成為一個解決腫瘤幸存者諸多問題中最嚴(yán)峻的問題。
　　 因?yàn)榘l(fā)育中的卵泡比處于靜止期的卵泡對化療藥物更敏感，所以提出抑制垂體-性腺軸來減少卵子的產(chǎn)生，使生

4、殖上皮對化療藥物不敏感，達(dá)到保護(hù)卵巢功能的目的。所以，許多研究者提出應(yīng)用促性腺激素釋放類似物（GnRH類似物）來抑制垂體-性腺軸，從而抑制化療藥物造成的卵巢損害。
　　 GnRH激動劑可刺激促性腺激素(FSH、LH)短暫增高，所謂“點(diǎn)火”(flare-up)效應(yīng)，其結(jié)果是性激素短暫性的升高，約需1-2周，這段時間可促使原始卵泡發(fā)育為成熟卵泡（即分裂活躍的細(xì)胞），而化療藥物恰恰作用于分裂活躍的細(xì)胞，這樣可能使卵巢對化療藥物更為敏感

5、。因此有學(xué)者提出應(yīng)用GnRH拮抗劑來代替GnRH激動劑，減少GnRH激動劑所需求的7-14天的等待期，達(dá)到抑制垂體-性腺軸的功能。實(shí)際上，Meirow等使用GnRH拮抗劑能減少不同劑量的環(huán)磷酰胺所致的原始卵泡的丟失。
　　 GnRH拮抗劑也有副反應(yīng)，如熱潮紅、骨礦物質(zhì)密度的減低，研究發(fā)現(xiàn)同時應(yīng)用低劑量的雌激素或應(yīng)用替勃龍可改善這些副反應(yīng)，Castelo等學(xué)者報(bào)道同時應(yīng)用替勃龍可以減少GnRH拮抗劑所致的血管舒縮癥狀和骨礦物質(zhì)丟失

6、，使長期應(yīng)用GnRH拮抗劑更安全有效。
　　 目的：
　　 探討促性腺激素釋放激素拮抗劑(GnRH拮抗劑)和雌激素聯(lián)合應(yīng)用對化療中小鼠卵巢的保護(hù)作用。
　　 材料與方法：
　　 1實(shí)驗(yàn)方法
　　 5-6周齡SPF級BALB/c雌性小鼠（體重18±3g），飼養(yǎng)一周熟悉環(huán)境后，每日晨9：00取陰道分泌物涂片觀察性周期，選取有正常性周期的40只小鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)，將進(jìn)入實(shí)驗(yàn)的40只小鼠隨機(jī)分為A、B、C、D組

7、，每組10只，A組為對照組，B組為順鉑組，C組為西曲瑞克（GnRH拮抗劑）+補(bǔ)佳樂（雌激素）組，D組為西曲瑞克+補(bǔ)佳樂+順鉑組，用藥后觀察并比較各組小鼠一般狀態(tài)、體重、卵巢、子宮濕重和卵巢組織結(jié)構(gòu)的變化，比較各組小鼠各級卵泡數(shù)量的變化，放射免疫方法測定各組小鼠血清促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)水平。
　　 2統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　 采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，定量指標(biāo)組間比較用One·Way ANOVA方

8、差分析，兩組間比較采用LSD，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05
　　 結(jié)果：
　　 1．順鉑組小鼠體重、卵巢子宮濕重與其余三組比較明顯減輕，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；西曲瑞克+補(bǔ)佳樂組、西曲瑞克+補(bǔ)佳樂+順鉑組兩組分別比較，與對照組比較，上述重量變化不大，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2．順鉑組小鼠血清E2水平較其余三組明顯下降，F(xiàn)SH水平較其余三組明顯上升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；西曲瑞克

9、+補(bǔ)佳樂組、西曲瑞克+補(bǔ)佳樂組+DDP組與對照組比較無顯著差別，三組兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3．順鉑組與其余三組相比，各期卵泡數(shù)都顯著減少，特別是生長卵泡和成熟卵泡，卵泡總數(shù)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;西曲瑞克+補(bǔ)佳樂組和西曲瑞克+補(bǔ)佳樂組+DDP組原始卵泡數(shù)顯著增加，生長和成熟卵泡顯著減少，分別與對照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但兩組的卵泡總數(shù)與對照組相比無明顯差別，差異無統(tǒng)