CXCR1-2拮抗劑G31P對順鉑誘導荷瘤小鼠腎損傷模型保護作用的研究.pdf

1、目的:
　　 順鉑(Cis-diammin-odichloroplatinum，DDP)是細胞周期非特異性藥物，具有細胞毒性，可抑制癌細胞的DNA復制過程，并損傷其細胞膜上結構，有較強的廣譜抗癌作用。臨床用于治療卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、甲狀腺癌及成骨肉瘤等多種實體腫瘤。但同時存在腎毒性、胃腸道反應、耳毒性和神經(jīng)毒性等多種毒副反應，盡管順鉑有較強的毒性，但由于良好的治療效果，依然是最常用的化療藥物之一。順鉑

2、高效抗腫瘤效應和多種毒副作用（尤其是對腎的毒性和損傷）呈劑量依賴性。急性腎功能衰竭（acuterenalfailure，ARF）作為順鉑治療最嚴重的并發(fā)癥[3]，研究其發(fā)病機制對于增加順鉑的臨床應用劑量，提高其抗腫瘤效應是非常重要的。順鉑引起的ARF，與細胞因子，粘附分子及腎組織中炎癥細胞如巨噬細胞、中性粒細胞浸潤相關[3-7]。趨化因子是一類重要的細胞因子，在炎癥的發(fā)生發(fā)展中具有重要功能。在炎癥早期，中性粒細胞及單核巨噬細胞在CXC趨

3、化因子與其受體CXCR1/CXCR2的作用下到達損傷部位產生免疫應答，釋放大量炎癥介質，導致?lián)p傷進一步加重。本文旨在利用CXCR1/CXCR2拮抗劑-G31P抑制炎癥的過度反應，減輕順鉑引起腎損傷，防止損傷的進一步加重，為防治順鉑應用導致的腎損傷提供新思路。
　　 方法:
　　 昆明鼠，210只，雌性，16-18g，隨機分為DDP、DDP+G31P、sDDP、G31P、Ca（腫瘤對照組）、Normal（正常對照組）六組。

4、(1)小鼠H22實體瘤模型的建立:DDP、DDP+G31P、sDDP、G31P、Ca組小鼠背部皮下接種H22細胞懸液，每只106。(2)腎損傷模型建立:接種腫瘤第七天，注射順鉑前半小時，DDP+G31P、G31P組小鼠背部皮下注射G31P500μg/kg，其余各組注射等體積的生理鹽水，以后隔天注射。半小時后DDP和DDP+G31P組小鼠，單次腹腔注射順鉑12.5mg/kg;sDDP組，單次腹腔注射順鉑2mg/kg/只;G31P及Ca組小

5、鼠腹腔注射等體積的生理鹽水。(3)采集標本:造模后觀察記錄小鼠一般狀態(tài)、體重變化。建立腎損傷模型后4h、8h、12h、24h、48h、72h、21d，每組分別取5只，眼內眥靜脈取血，測定血清尿素氮(BUN)和肌酐(SCr);之后處死小鼠，取雙腎測稱重，計算腎系數(shù);取部分腎組織提取總mRNA，qPCR檢測IL-1β、KC、MIP-2mRNA的表達;剝離實體腫瘤，稱重，免疫組化檢測VEGF-D;分離腹股溝淋巴結，HE染色，檢測腫瘤轉移情況。

6、
　　 結果:
　　 (1)血清BUN和SCr:注射DDP后，血清BUN和SCr增高，在48h達到峰值，大劑量DDP最高分別為10.95mmol/l和67.26μmol/l，G31P與大劑量DDP聯(lián)合應用，使血清BUN和SCr顯著降低分別為8.22mmol/l和58.81μmol/l(p＜0.05)，與小劑量的DDP組相似。
　　 (2)腎系數(shù):注射DDP后，腎系數(shù)逐漸增大，大劑量DDP與G31P聯(lián)合應用顯著小于

7、大劑量DDP組，在72h差異最明顯，分別為11.13g/kg和13.54g/kg(p＜0.05)，與小劑量DDP組12.02g/kg差異不明顯。
　　 (3)腎臟炎癥因子:大劑量DDP導致腎臟損傷嚴重，IL-1β、KC、MIP-2mRNA表達增加，與G31P聯(lián)合應用后，明顯降低(p＜0.05)。
　　 (4)腫瘤重量:大劑量DDP明顯抑制腫瘤生長，腫瘤平均1.01g小于小劑量DDP治療組1.448g和G31P治療組1.6

8、7g，大劑量DDP與G31P聯(lián)合應用，抑制腫瘤效果更顯著，平均0.575g。同時，G31P也有一定的抑瘤效果，腫瘤為1.67g，明顯小于腫瘤組2.06g。
　　 (5)腫瘤組織VEFG-D表達及腫瘤轉移:相對其他各組，大劑量DDP組與大劑量DDP+G31P組，腫瘤組織VEFG-D表達降低，腹股溝淋巴結中腫瘤細胞減少。
　　 結論:
　　 血清BUN和SCr升高、腎系數(shù)增大、腎臟炎癥因子表達增多，顯示大劑量順鉑導致

9、荷瘤小鼠腎功能損傷，炎癥細胞浸潤，產生免疫應答的同時，釋放大量炎癥介質。順鉑誘導的腎損傷，產生炎癥，可引起劇烈的二次（多次）損傷波，最終可導致腎功能嚴重受損。CXCR1/CXCR2拮抗劑-G31P通過與中性粒細胞等炎癥細胞競爭結合CXCR1/CXCR2，抑制炎癥的發(fā)展，減輕順鉑對腎臟的副作用。與大劑量DDP單獨應用比較，大劑量DDP和G31P聯(lián)合應用，抑制腫瘤的效果更顯著，腎毒性也顯著降低，這為臨床提高順鉑應用劑量和防治順鉑導致的腎功能