肺腺癌細(xì)胞miR-185水平與HMGA2、CCNE1表達(dá)及對(duì)腫瘤細(xì)胞遷徙和增殖能力的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過(guò)檢測(cè)miR-185和其預(yù)測(cè)靶基因HMGA2、CCNE1在人支氣管上皮細(xì)胞及肺腺癌細(xì)胞中表達(dá)情況分析二者之間相關(guān)性。MTT法和Transwell小室測(cè)定人支氣管上皮細(xì)胞及肺癌細(xì)胞的增殖活性和遷徙能力，研究miR-185對(duì)于肺癌細(xì)胞遷徙、增殖能力的影響。
　　方法：培養(yǎng)人支氣管上皮細(xì)胞16HBE及肺腺癌細(xì)胞 A549、LTEP-a-2、NCI-H1975、NCI-H1650，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)人支氣管上皮細(xì)胞及4種肺

2、腺癌細(xì)胞的miR-185的表達(dá)情況以及miR-185的預(yù)測(cè)靶基因HMGA2、CCNE1 mRNA在細(xì)胞中的表達(dá)水平,分析miR-185和HMGA2、CCNE1 mRNA相關(guān)性。采用western blot檢測(cè)人支氣管上皮細(xì)胞及4種肺腺癌細(xì)胞中的HMGA2蛋白、CCNE1蛋白的表達(dá)。分析miR-185和HMGA2、CCNE1基因表達(dá)相關(guān)性。MTT法和Transwell小室比較人支氣管上皮細(xì)胞及肺癌細(xì)胞的增殖遷徙能力差異，分析 miR-18

3、5對(duì)于肺癌細(xì)胞遷徙、增殖能力的影響。
　　結(jié)果：MiR-185在4株肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、LTEP-a-2、NCI-H1975、NCI-H1650的相對(duì)表達(dá)均低于人支氣管上皮細(xì)胞16HBE，差異有顯著性(F=286.476,P<0.05)。HMGA2 mRNA在4株肺腺癌細(xì)胞系中表達(dá)水平明顯高于16HBE，差異有顯著性(F=184.238,P<0.05)。HMGA2 mRNA在16HBE、LTEP-a-2、NCI-H1650、NC

4、I-H1975、A549中的表達(dá)水平是逐漸升高的。Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)人支氣管上皮細(xì)胞和肺腺癌細(xì)胞 miR-185的表達(dá)水平與 HMGA2 mRNA表達(dá)水平之間呈負(fù)相關(guān)（r=-0.976,P<0.01）。CCNE1mRNA在4株肺腺癌細(xì)胞中表達(dá)水平明顯高于16HBE，差異有顯著性(F=1959.754,P<0.05)。CCNE1mRNA在16HBE、LTEP-a-2、NCI-H1650、NCI-H1975、A549中的表達(dá)是逐漸

5、升高的。Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)人支氣管上皮細(xì)胞及肺腺癌細(xì)胞中miR-185的表達(dá)水平與CCNE1 mRNA的含量之間存在負(fù)相關(guān)（r=-0.945，P<0.05）。Western blot結(jié)果顯示HMGA2蛋白在人支氣管上皮細(xì)胞中是不表達(dá)的，但是在4株肺腺癌細(xì)胞中均表達(dá)，差異有顯著性（F=46.135，P<0.05）。CCNE1蛋白在肺腺癌細(xì)胞中的表達(dá)均高于人支氣管上皮細(xì)胞，差異有顯著性（F=253.631，P<0.05）。MTT實(shí)

6、驗(yàn)顯示人支氣管上皮細(xì)胞及肺腺癌細(xì)胞的增殖能力有差異，差異具有顯著性。Transwell小室結(jié)果顯示人支氣管上皮細(xì)胞及肺腺癌細(xì)胞的遷徙能力是有差別的，差異具有顯著性。在肺腺癌細(xì)胞株miR-185的表達(dá)下降，其增殖和遷徙能力呈增強(qiáng)趨勢(shì)，二者具有相關(guān)性。
　　結(jié)論：在肺腺癌中存在miRNA-185表達(dá)水平降低和HMGA2和CCNE1表達(dá)增高，二者之間有負(fù)相關(guān)性。肺腺癌細(xì)胞株，其增殖和遷徙能力增強(qiáng)，miR-185的表達(dá)下降，二者具有負(fù)相關(guān)