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文檔簡介
1、目的:觀察二苯乙烯苷(2,3,5,4′-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside,TSG)對H2O2損傷的HUVECs細胞的保護作用。探究TSG抗H2O2誘導的HUVECs細胞凋亡機制是否通過促進XIAP表達,抑制Caspase-9和Caspase-3表達實現(xiàn)的。方法:以300μM H2O2損傷HUVECs細胞構(gòu)建內(nèi)皮細胞損傷模型。1-100μM TSG預處理24 h,H2O2誘導細胞損傷,觀察細胞凋
2、亡情況、XIAP表達及Caspase-9、Caspase-3表達變化。采用MTT檢測細胞活力,Hoeschest染色檢測細胞凋亡, RT-PCR檢測XIAP、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表達,Western Blot檢測XIAP、Caspase-3、Caspase-9蛋白表達。
結(jié)果:300μM H2O2作用HUVECs細胞24 h可有效降低細胞活力,誘導細胞凋亡;1-100μM TSG預處理24h可有效恢
3、復細胞活力,提高存活率;30μM Embelin預處理6 h后再用TSG預處理24h,細胞凋亡率較TSG預處理組明顯上升,細胞活力顯著降低。TSG、Embelin單獨作用組細胞活力較正常對照組無明顯差異。
RT-PCR、Western Blot結(jié)果顯示:與正常對照組相比,H2O2處理組 XIAP mRNA及蛋白表達水平顯著降低,Caspase-9、Caspase-3表達明顯升高;與H2O2組相比,1-100μM TSG預處理2
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