腦深部電刺激治療帕金森病異動(dòng)癥的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、PD是神經(jīng)內(nèi)科常見的變性疾病，多見于中老年患者，具有較高的發(fā)病率和患病率；目前認(rèn)為其發(fā)病主要是由中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元脫失所致，臨床一旦出現(xiàn)癥狀，多巴胺神經(jīng)元的脫失多在80％以上。PD的治療自上世紀(jì)60年代起多使用左旋多巴行藥物替代，但臨床發(fā)現(xiàn)服用該藥物的患者在癥狀緩解的同時(shí)，出現(xiàn)了明顯的運(yùn)動(dòng)并發(fā)癥——異動(dòng)癥(LID)，LID的發(fā)生情況和出現(xiàn)時(shí)間存在明顯個(gè)體差異，多數(shù)發(fā)生于使用Levodopa后的5-8年，發(fā)生率可達(dá)30-80％。目前認(rèn)

2、為LID是由于波動(dòng)性Levodopa治療，導(dǎo)致多巴胺受體敏感性增高，而且其發(fā)生與基底節(jié)直接通路和間接通路失平衡相關(guān)。PD和LID的基礎(chǔ)和臨床研究是神經(jīng)內(nèi)科研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)。 本研究通過制備成功的PD、LID、LID的單側(cè)STN-DBS大鼠模型，在觀察高頻電刺激對大鼠模型行為學(xué)方面產(chǎn)生影響的同時(shí)，研究大鼠模型腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)含量的變化以探討DBS治療的作用和可能機(jī)制。通過向健康雌性SD大鼠前腦內(nèi)側(cè)束(MFB)二點(diǎn)注射6-羥多巴(6-O

3、HDA)，并經(jīng)阿撲嗎啡(Apo)誘導(dǎo)判斷的方法制備成功SD大鼠的偏側(cè)PD模型；其次，通過長期波動(dòng)性腹腔注射左旋多巴甲酯和芐絲肼誘導(dǎo)制備LID的大鼠模型；然后通過立體定向方法在成功LID大鼠模型的右側(cè)丘腦底核(STN)處植入刺激電極，并給予高頻電刺激以制備LID的單側(cè)STN-DBS模型，為行為學(xué)觀察研究和STN-DBS治療機(jī)制研究探討奠定基礎(chǔ)；通過對成功制備的LID的單側(cè)STN-DBS大鼠模型進(jìn)行高頻電刺激，觀察其對大鼠模型行為學(xué)方面的影

4、響，從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、基礎(chǔ)研究角度探討DBS對LID的治療效果；研究了STN-DBS引起的帕金森病異動(dòng)癥大鼠模型腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)含量的變化；通過對LID大鼠模型進(jìn)行單側(cè)STN高頻電刺激，研究LID大鼠模型紋狀體區(qū)總DARPP-32以及其磷酸化蛋白——Phosphor-Thr34-DARPP-32和Phosphor-Thr75-DARPP-32的表達(dá)變化，探討其在LID中的價(jià)值及DBS治療對其產(chǎn)生的影響。 本研究表明：①通過向MFB二點(diǎn)注射

5、6-OHDA、長期波動(dòng)性腹腔注射左旋多巴甲酯和芐絲肼、以及在LID大鼠模型右側(cè)STN處植入刺激電極并進(jìn)行高頻電刺激可以成功制備PD、LID和LID的單側(cè)STN-DBS模型，觀察發(fā)現(xiàn)當(dāng)高頻電刺激輸出頻率為130Hz、刺激脈沖為60μs、輸出電量為150μA時(shí)，LID的STN-DBS大鼠模型可出現(xiàn)明顯的行為變化。②以高頻電刺激輸出頻率為130Hz、刺激脈沖為60μs、輸出電量為150μA，對LID的單側(cè)STN-DBS模型大鼠進(jìn)行高頻電刺激可

6、以使由左旋多巴甲酯和芐絲肼誘導(dǎo)產(chǎn)生的模型大鼠不自主行為(AIM)和旋轉(zhuǎn)行為得到改善，因而從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面表明STN-DBS治療LID的有效性。③STN-DBS可以使STN層面的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)——谷氨酸(Glu)的免疫組織化學(xué)染色增強(qiáng)；也可使SNr層面的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)——γ-氨基丁酸(GABA)免疫組織化學(xué)染色增強(qiáng)；通過HPLC方法測定模型大鼠紋狀體區(qū)Glu和GABA神經(jīng)遞質(zhì)含量均明顯降低，提示STN-DBS可能增強(qiáng)了STN投向GPi和SN

7、r的興奮性，使SNr釋放并傳遞至丘腦的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)——GABA增加，加強(qiáng)對丘腦興奮性神經(jīng)遞質(zhì)Glu釋放并傳遞的抑制作用，最終改善了LID的癥狀。④LID大鼠模型紋狀體區(qū)總DARPP-32蛋白的表達(dá)變化不明顯，DARPP-32的Thr34磷酸化蛋白在LID模型大鼠的毀損側(cè)表達(dá)相對增加，而DARPP-32的Thr75磷酸化蛋白表達(dá)相對降低；經(jīng)STN-DBS后模型大鼠紋狀體區(qū)總DARPP-32蛋白表達(dá)變化不明顯，但毀損側(cè)DARPP-32的T