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文檔簡介
1、目的:以棕櫚酸體外培養(yǎng)胰島β細(xì)胞(NIT-1細(xì)胞)模擬體內(nèi)氧化應(yīng)激導(dǎo)致的血糖和血脂代謝障礙產(chǎn)生的內(nèi)環(huán)境改變,用龍血素B對(duì)棕櫚酸造成的NIT-1細(xì)胞的損傷進(jìn)行干預(yù),初步探討龍血素B對(duì)棕櫚酸培養(yǎng)環(huán)境下NIT-1細(xì)胞的抗氧化保護(hù)作用及其機(jī)制。
方法:以小鼠胰島β細(xì)胞系NIT-1細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組,5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L的龍血素B對(duì)照組,棕櫚酸組,5μmol/L、10μmol/L和20μm
2、ol/L的龍血素B干預(yù)組。用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測細(xì)胞活性,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基(ROS)含量和細(xì)胞早期凋亡率,RT-PCR技術(shù)檢測葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)受體-2(GLUT-2)編碼基因表達(dá)水平。
結(jié)果:和棕櫚酸組比較,10μmol/L和20μmol/L的龍血素B可以使NIT-1細(xì)胞活性存活率顯著上升(p<0.05)。5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L的龍血素B均可顯著降低細(xì)胞活性氧含量和細(xì)胞早期凋亡率
3、(p<0.05)。20μmol/L的龍血素B可以提高GLUT-2編碼基因的表達(dá)水平(p<0.05),5μmol/L和10μmol/L的龍血素B對(duì)GLUT-2編碼基因的表達(dá)水平無明顯影響(p>0.05)。
結(jié)論:棕櫚酸可以使細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基(ROS)增多,導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激,使細(xì)胞凋亡率增加,抑制NIT-1細(xì)胞的增殖,并導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)與糖代謝相關(guān)基因GLUT-2的相對(duì)表達(dá)量降低,從而影響細(xì)胞糖代謝。龍血素B可以提高體外棕櫚酸培養(yǎng)
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