艾塞那肽對(duì)棕櫚酸作用下大鼠胰島β細(xì)胞FTO表達(dá)及氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、背景：
　　最新調(diào)查顯示，我國(guó)糖尿病(diabetic mellitus，DM)患病率約為11.6％，是繼腫瘤及心腦血管疾病后第三位威脅國(guó)人健康的非傳染性重大疾病。研究證實(shí)，脂毒性是2型糖尿病(T2DM)發(fā)病的重要機(jī)制之一，由高脂導(dǎo)致氧化應(yīng)激增強(qiáng)是胰島β細(xì)胞脂性凋亡的基本途徑。眾所周知，肥胖是T2DM未來(lái)風(fēng)險(xiǎn)的主要預(yù)測(cè)因子，而在脂肪代謝中起著重要作用的肥胖相關(guān)基因(fatmassandobesity-associatedgene，

2、FTO)，則被作為兩者的共同分子途徑受到人們的關(guān)注。既往研究發(fā)現(xiàn)，高脂飲食可誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞FTO的表達(dá)增加，那么棕櫚酸作用下胰島β細(xì)胞的FTO表達(dá)是否也會(huì)增加呢？胰高血糖素樣肽-1（glucagon-likepeptide-1，GLP-1）做為新型降糖藥應(yīng)用于臨床的同時(shí)觀察到其有抗氧化應(yīng)激、抗凋亡的作用，目前已成為研究的熱點(diǎn)，但是其具體分子機(jī)制尚未完全闡明。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路是目前所知較重要的抗凋亡通路

3、。GLP-1受體激動(dòng)劑艾塞那肽(Exenatide)是否通過(guò)PI3K/Akt通路改善高脂引起的胰島β細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷，并下調(diào)FTO表達(dá)，目前國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。
　　目的：
　　探討(1)棕櫚酸(palmiticacid，PA)對(duì)大鼠胰島β細(xì)胞(INS-1)FTO表達(dá)的影響;(2)艾塞那肽對(duì)高脂誘導(dǎo)的β細(xì)胞FTO表達(dá)、氧化應(yīng)激的影響及其可能機(jī)制。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)大鼠胰島β細(xì)胞INS-1，實(shí)驗(yàn)分兩部分。第

4、一部分共分4組:①正常組:培養(yǎng)液中未加棕櫚酸;②PA0.125組:培養(yǎng)液棕櫚酸濃度為0.125mmol/L;③PA0.25組:培養(yǎng)液棕櫚酸濃度為0.25mmol/L;④PA0.5組:培養(yǎng)液棕櫚酸濃度為0.5mmol/L。第二部分共分5組:①正常組:培養(yǎng)液中未加棕櫚酸;②正常+艾塞那肽組:培養(yǎng)液中未加棕櫚酸，艾塞那肽濃度為10nmol/L;③高脂組:培養(yǎng)液中棕櫚酸濃度為0.5mmol/L;④高脂+艾塞那肽組:培養(yǎng)液棕櫚酸濃度為0.5mmo

5、l/L，艾塞那肽濃度為10nmol/L;⑤高脂+艾塞那肽+PI3K抑制劑組:高脂培養(yǎng)液中加入濃度為10nmol/L的艾塞那肽及濃度為50μmol/L的PI3K抑制劑LY294002。其中，PA、Exenatide及PI3K抑制劑LY294002的濃度均是由預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果而確定的。以上各組細(xì)胞均在相同環(huán)境下培養(yǎng)48h，酶標(biāo)儀法檢測(cè)并計(jì)算出第二部分5組細(xì)胞上清液中的丙二醛(malondialdehyde，MDA)、還原型谷胱甘肽（glutath

6、ione，GSH）水平;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)各組細(xì)胞FTOmRNA的表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件采用SPSS17.0。
　　結(jié)果：
　　1、與正常組比較，不同濃度的棕櫚酸作用下FTOmRNA的表達(dá)量均顯著增加（P＜0.01）。其中，與PA0.125組、PA0.25組比較，PA0.5組的FTO的表達(dá)顯著升高（P＜0.01）;而PA0.25與PA0.125組比較，差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2、

7、與正常組比較，正常+艾塞那肽組FTO表達(dá)及MDA、GSH水平均無(wú)變化（P＞0.05）;高脂組FTO表達(dá)、MDA水平顯著升高，GSH水平顯著降低(P＜0.01)。
　　3、與高脂組比較，高脂+艾塞那肽組FTO表達(dá)、MDA水平顯著降低，GSH水平顯著升高（P＜0.01）。
　　4、與高脂+艾塞那肽組比較，高脂+艾塞那肽+PI3K抑制劑組FTO表達(dá)、MDA水平顯著升高，GSH水平顯著降低(P＜0.01)。
　　結(jié)論：