針刺對胰島素抵抗大鼠氧化應激的影響.pdf

1、胰島素抵抗與高血壓、糖尿病、血脂異常、心腦血管疾病、肥胖等多種疾病密切相關，是導致這些疾病的“共同土壤”。近年來的研究表明:胰島素抵抗是心腦血管疾病中眾多代謝性異常的始動原因和致病基礎，而血管內皮功能障礙是動脈粥樣硬化、高血壓、心腦血管疾病發(fā)生盼病理基礎和早期階段。胰島素抵抗和血管內皮功能障礙二者之間存在相互影響、相互促進的關系，形成惡性循環(huán)，在動脈粥樣硬化的病理過程中扮演著重要的角色。大量的臨床研究報道證實，針刺在這些疾病的治療中具有

2、不可替代的優(yōu)勢，其作用機理與改善這些疾病中存在的胰島素抵抗現(xiàn)象密切相關。通過本課題組的前期研究，我們發(fā)現(xiàn)針刺能有效改善胰島素的敏感性，能從受體后水平調整和改善胰島素抵抗狀態(tài)。本研究是以胰島素抵抗與血管內皮功能障礙相互作用為基礎，設計實驗觀察針刺干預對胰島素抵抗模型大鼠的內皮功能影響;以自發(fā)性胰島素抵抗模型-OLETF大鼠及同系正常大鼠-LETO大鼠為研究對象，用ELISA法、硝酸還原酶法、硫代巴比妥酸等等多種檢測方法，檢測空腹血糖(FP

3、G)、血清胰島素(FINS)、C肽、胰島素敏感指數(shù)(ISI)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)等血液指標，觀察針刺干預對OLETF大鼠胰島素抵抗及內皮功能障礙共同基礎的氧化應激的影響，探討針刺對胰島素抵抗及血管內皮功能障礙的作用機制。
　　目的：觀察針刺對自發(fā)性胰島素抵抗模型OLETF大鼠的氧化應激的影響，探討針刺干預對改善胰島素抵抗及血管內皮功能障礙的作用機理。
　　方法：實驗選用雄性OLETF大鼠16只，正常雄性LET

4、O大鼠8只。將8只雄性LETO大鼠作為空白組，16只雄性OLETF大鼠按體重根據(jù)隨機數(shù)字表分為:模型組和針刺組，每組各8只?？瞻捉M和模型組不予針刺干預，針刺組則給予針刺干預。針刺穴位:腎俞、內關、足三里和三陰交穴（均取雙側）。針刺方式選用疏密波的電針（疏波2Hz，密波50Hz，調制頻率10次/分），加電穴位選取雙側三陰交和足三里穴，電針刺激強度以大鼠肢體輕微抖動為標準，針刺時間每日1次，每次持續(xù)20min，針刺干預持續(xù)4周。針刺前4周及

5、針刺4周療程中，每周稱重一次。在治療結束后，各組大鼠禁食不禁水12h。次日早晨取材。先用10％水合氯醛按體重將大鼠麻醉，采用眼眶靜脈竇采血，離心取上清，檢測針刺干預后FPG、FINS、C-P、NO、ET、SOD及MDA等指標，用葡萄糖氧化酶法測定FPG;用ELISA法測定FINS、C-P、ET;用硝酸還原酶法測定NO;用WST-1微孔板法測定SOD;硫代巴比妥酸(TBA法)測定丙二醛(MDA);用1/(CFPG×JFINS)公式計算IS

6、I。取完血液樣品后，將大鼠四肢固定于鼠板上，沿腹中線開腹，從下往上分離出主動脈，截取胸主動脈，沿血管腔縱向剪開，置于4％多聚甲醛固定，HE染色。觀察針刺作用前后，OLETF大鼠主動脈形態(tài)學改變情況。
　　結果：⑴在實驗過程中，正常對照組大鼠體重增加，精神狀態(tài)良好，反應靈敏，動作自如，毛發(fā)有光澤。針刺前4周開始可見模型組及針刺組大鼠性情變溫順，嗜睡少動，大鼠皮毛蓬亂、無光澤，大便量較正常組偏少，色灰，質較軟，腹部肥胖。針刺4周后，可

7、見針刺組大鼠體重仍有增長，表現(xiàn)出精神萎靡，反應遲鈍，動作遲緩等較前有所好轉。⑵模型組的FPG、FINS、C-P相比空白組顯著升高（P＜0.01），ISI較空白組顯著降低(P＜0.01)。針刺組的C-P相比空白組顯著降低（P＜0.05），F(xiàn)PG、FINS和ISI與空白組相比無統(tǒng)計學差異。針刺組的FPG、FINS、C-P較模型組顯著降低（P＜0.01），ISI相比模型組顯著升高（P＜0.01）。⑶模型組的血清NO的水平相比空白組顯著降低(P

8、＜0.01)，模型組ET-1水平相比空白組顯著升高（P＜0.01）。針刺組的NO、ET-1水平相較空白組無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。針刺組的血清NO水平相比模型組顯著升高（P＜0.05），ET-1水平與模型組相比明顯降低(P＜0.01)。⑷模型組的血清SOD活力水平相比空白組明顯降低（P＜0.05），模型組MDA水平相比空白組顯著升高（P＜0.01）。針刺組的SOD活力水平、MDA相較空白組無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。針刺組的血清S

9、OD活力相比模型組顯著升高(P＜0.05)，MDA水平與模型組相比明顯降低（P＜0.01）。⑸各組大鼠主動脈HE染色后于數(shù)碼成像顯微鏡下以200倍觀察，可見空白對照組大鼠的血管內膜光滑完整、連續(xù)，無局部缺損或增厚，彈力纖維、血管平滑肌細胞排列整齊，未見浸潤的淋巴細胞等病理改變（見圖9）。而模型組大鼠的主動脈內皮層不連續(xù)，明顯失去內膜的完整性，內皮下層呈疏松或斷裂狀態(tài)，血管平滑肌細胞增生、肥大且排列紊亂(見圖10)。當給予一定療程針刺干預