艾塞那肽對(duì)糖尿病大鼠認(rèn)知功能的影響及機(jī)制.pdf

1、【目的】
　　觀測(cè)胰高血糖素樣肽1（GLP-1）受體激動(dòng)劑艾塞那肽對(duì)糖尿病大鼠認(rèn)知功能的影響，并探討其可能的機(jī)制。
　　【方法】
　　雄性健康的Wistar大鼠，通過(guò)隨機(jī)數(shù)字法隨機(jī)分為對(duì)照組、糖尿病模型組和艾塞那肽治療組。用鏈脲佐菌素按60 mg/kg體重，通過(guò)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型；艾塞那肽治療組大鼠通過(guò)皮下注射艾塞那肽（1 nmol/kg/天）共8周，其余2組大鼠給予同等體積的生理鹽水。測(cè)量大鼠的體重，觀察大鼠

2、的一般情況。分別采用葡萄糖氧化酶法和放免法測(cè)定血糖和血胰島素濃度；采用Morris水迷宮法評(píng)價(jià)大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力，包括大鼠的逃避潛伏期、中心區(qū)域停留時(shí)間的百分比和通過(guò)原平臺(tái)位置的次數(shù)；采用H-E染色法觀察大鼠海馬的組織結(jié)構(gòu)，用Image Pro Plus6.0圖像分析軟件計(jì)算大鼠海馬組織中神經(jīng)細(xì)胞的密度；采用Tunel染色法檢測(cè)大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡；采用Western blot檢測(cè)大鼠海馬組織中細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2和

3、caspase-3、胰島素受體（IR）、胰島素受體底物-1（IRS-1）和胰島素受體底物-2（IRS-2）蛋白的表達(dá)水平。
　　【結(jié)果】
　?。?）糖尿病模型組大鼠從造模成功后，出現(xiàn)明顯多飲、多尿和多食現(xiàn)象，大鼠的毛發(fā)較枯黃，沒(méi)有光澤，精神明顯萎靡，活動(dòng)明顯減少，對(duì)外界刺激反應(yīng)不靈敏。
　?。?）與對(duì)照組比較，在實(shí)驗(yàn)的第4周和第8周，糖尿病模型組大鼠體重均顯著降低，空腹血糖值明顯升高，空腹血胰島素水平明顯降低（均 P﹤

4、0.05）；與糖尿病模型組比較，艾塞那肽組大鼠的體重顯著增加，空腹血糖水平顯著降低，而空腹血胰島素水平明顯增加（均P﹤0.05）。
　?。?）與對(duì)照組比較，糖尿病模型組大鼠的逃避潛伏期即找到站臺(tái)所需要的時(shí)間顯著延長(zhǎng)（P<0.05），在中心區(qū)域停留時(shí)間的百分比和通過(guò)原平臺(tái)位置的次數(shù)均明顯降低（均P<0.05）；艾塞那肽治療組大鼠逃避潛伏期明顯縮短（P<0.05），中心區(qū)域停留時(shí)間的百分比和通過(guò)原平臺(tái)位置的次數(shù)與糖尿病模型組比較均顯著

5、增加（均P<0.05）。
　?。?）對(duì)照組大鼠海馬回神經(jīng)細(xì)胞的輪廓清晰，細(xì)胞整齊排列，細(xì)胞漿的染色均勻，細(xì)胞的核仁清楚；糖尿病組大鼠的海馬回神經(jīng)元結(jié)構(gòu)模糊，神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)了不同程度的核固縮，神經(jīng)細(xì)胞體積變小，部分分區(qū)的神經(jīng)細(xì)胞稀少，海馬回神經(jīng)細(xì)胞排列紊亂，其中以CAl最為明顯；艾塞那肽組大鼠的海馬回上述病理學(xué)改變明顯減輕，神經(jīng)細(xì)胞未見(jiàn)明顯的核固縮和細(xì)胞體積縮小，神經(jīng)細(xì)胞較整齊。
　?。?）與對(duì)照組比較，糖尿病組大鼠的海馬回CA

6、1和CA2區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的密度顯著降低（均P<0.05）；與糖尿病組比較，艾塞那肽組大鼠的海馬回CA1和CA2區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的密度顯著增加（均P<0.05）。
　?。?）與對(duì)照組比較，糖尿病模型組大鼠的海馬回CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡率顯著增加（P<0.05）；與糖尿病模型組比較，艾塞那肽組大鼠的海馬回CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡率顯著降低（P<0.05）。
　?。?）與對(duì)照組比較，糖尿病模型組大鼠的海馬組織中caspase-3和Bax的表達(dá)

7、均顯著上調(diào)（均P<0.05），而B(niǎo)cl-2的表達(dá)顯著下調(diào)（P<0.05），Bax/Bcl-2比值顯著增加（P<0.05）；與糖尿病模型組比較，艾塞那肽組大鼠的海馬組織caspase-3和Bax的表達(dá)顯著下調(diào)（均P<0.05），而B(niǎo)cl-2的表達(dá)顯著上調(diào)（P<0.05），Bax/Bcl-2比值顯著降低（P<0.05）。
　?。?）與對(duì)照組比較，糖尿病模型組大鼠的海馬組織中胰島素受體、IRS-1和2的表達(dá)均顯著下調(diào)（均P<0.05）；