一遺傳性單純少毛癥家系的基因定位.pdf

1、目的收集一遺傳性單純少毛癥家系，通過定位候選克隆技術(shù)，識(shí)別該病的致病基因，以闡明遺傳性單純少毛癥的發(fā)病機(jī)制。方法經(jīng)知情同意后收集家系成員的臨床資料及血液樣本，繪制家系圖；抽提外周血基因組DNA，用ABI公司的商品化的微衛(wèi)星標(biāo)記marker，進(jìn)行全基因組掃描，采用Genescan和Genotyper軟件進(jìn)行基因分型；采用Linkage軟件包進(jìn)行連鎖分析，初步明確致病基因的區(qū)域；在該區(qū)域內(nèi)選擇覆蓋密度更高的引物進(jìn)行精細(xì)定位，縮小致病基因的范

2、圍；在人類基因組數(shù)據(jù)庫(kù)(http：∥genome．ucsc．edu/)中對(duì)候選區(qū)域內(nèi)的基因進(jìn)行搜索，確定候選基因，進(jìn)行大規(guī)模突變篩查，最終找到致病基因。結(jié)果1．收集到一遺傳性單純少毛癥家系，整理了該家系成員完整的臨床資料，繪制了家系圖。2．抽提并保存了全部家系成員的DNA樣本。3．對(duì)該家系成員DNA樣本進(jìn)行了全基因組掃描，在微衛(wèi)星標(biāo)記D13S217處得到最高LODs值3.74(重組率θ=0.00)，把該病致病基因定位于標(biāo)記物D13S17

3、5和D13171之間的19.0cM范圍內(nèi)。4．通過精細(xì)定位和單倍型分析將致病基因的范圍縮小到標(biāo)記物D13S22l和D13S1244之間的2.28cM范圍，即染色體13q12.13～12.02。5．對(duì)人類基因組數(shù)據(jù)庫(kù)(http：∥genome．ucsc．edu/)，這一區(qū)域內(nèi)的基因進(jìn)行搜索，初步確定了19個(gè)候選基因。結(jié)論本研究將遺傳性單純少毛癥的致病基因定位于染色體13q12.13～12.2，初步確定了19個(gè)候選基因。意義定位了遺傳性單純