遺傳性白內(nèi)障家系致病基因的篩查與鑒定.pdf

1、目的：
　　先天性白內(nèi)障是一種重要的致盲性眼病，約占嬰幼兒盲的1/3。白內(nèi)障在嬰幼兒中的發(fā)病率約為0.01-0.06％，大約1/3具有遺傳性。隨著遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的進(jìn)展，目前已報(bào)道了至少三十幾個致病基因與上千個致病位點(diǎn)與遺傳性白內(nèi)障相關(guān)。雖然遺傳性白內(nèi)障具有臨床異質(zhì)性和基因型異質(zhì)性，但仍具有一定的對應(yīng)關(guān)系，這也是基因篩查的思路之一。對遺傳性白內(nèi)障進(jìn)行致病基因的篩查可豐富致病基因庫，進(jìn)而研究致病基因與蛋白質(zhì)的功能，有助于闡明遺傳性

2、先天性白內(nèi)障的發(fā)病機(jī)理，提高我國的出生質(zhì)量。
　　方法：
　　1、本實(shí)驗(yàn)收集2個遺傳性先天性白內(nèi)障家系。繪制系譜圖顯示具有常染色體顯性遺傳特點(diǎn)。
　　2、門診進(jìn)行眼前段照相，并進(jìn)行詳細(xì)的眼科檢查后排出眼部其他疾病，問病史可知患者無全身其他疾病。
　　3、經(jīng)患者和家屬同意后，采集家系成員外周靜脈血1ml。
　　4、根據(jù)臨床表型查閱與遺傳性白內(nèi)障相關(guān)的文獻(xiàn)，選取候選基因并設(shè)計(jì)引物，通過聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增

3、DNA片段，瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段，確定擴(kuò)增出目的片段后直接測序法尋找致病基因及突變位點(diǎn)。
　　結(jié)果：
　　1、家系一:符合常染色體顯性遺傳家特征，先證者表型為后極性白內(nèi)障，家系內(nèi)患者均檢測到CRYGD基因的第127位堿基T變成C，結(jié)果導(dǎo)致第43位色氨酸變成精氨酸(W43R)，家系內(nèi)正常人均不存在該點(diǎn)突變。
　　2、家系二:符合常染色體顯性遺傳家特征，先證者表型為珊瑚狀白內(nèi)障，家系內(nèi)患者均檢測到CRYGD基因的第