脂聯(lián)素對足細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：本課題的目的是為了研究在高糖或PAN條件下，脂聯(lián)素是否會(huì)影響足細(xì)胞的凋亡。
　　方法：將培養(yǎng)的足細(xì)胞分別分成以下幾組：（1）正常糖濃度對照組（5.5mmo l/L）;(2)高糖組（30mmol/L）;(3)高糖30mmol/L+脂聯(lián)素（2.5ug/ml）；（4）PAN組（50 mg/L）;(5)PAN+脂聯(lián)素組（2.5 ug/ml）,分別干預(yù)12 h、24 h、48 h之后通過AnnexinV/PI法和原位末端標(biāo)記法（TUN

2、EL)法檢測各組足細(xì)胞凋亡率，通過RealtimePCR實(shí)時(shí)熒光定量檢測調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白基因bax、bcl-2、caspase3等mRNA量的變化，最后運(yùn)用western-blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Bax、Caspase3等表達(dá)量的變化。
　　結(jié)果：（1）Anne xinV/PI和TUNEL法測定的足細(xì)胞凋亡率：高糖組足細(xì)胞凋亡率高于正常糖組而低于高糖+脂聯(lián)素組，PAN組足細(xì)胞凋亡率高于正常糖組而低于PAN+脂聯(lián)素組；（2）熒光實(shí)時(shí)

3、定量PCR測定Bax、Bcl-2、caspase3等mRNA量的變化：高糖組Bax、bcl-2和caspase3 mRNA表達(dá)量高于正常糖組和高糖+脂聯(lián)素組，PAN組Bax、bcl-2和caspase3 mRNA表達(dá)量高于正常糖組和PAN+脂聯(lián)素組；（3）western-blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Bax、Caspase3等表達(dá)量：高糖組Bax和Caspase3蛋白表達(dá)量高于正常糖組和高糖+脂聯(lián)素組，PAN組Bax和Caspase3表達(dá)量高