脂聯(lián)素對胰島細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制的研究.pdf

1、本研究以瘦素為啟示，以研究脂聯(lián)素與胰島β細(xì)胞功能的關(guān)系為切入點(diǎn)，試圖探索脂聯(lián)素更為廣泛的生理作用。在進(jìn)行體外研究前，首先必須建立體外大鼠胰島分離純化技術(shù)平臺。制備足夠數(shù)量、高活性的胰島是研究的前提和關(guān)鍵因素。本研究采用經(jīng)胰管內(nèi)灌注Ⅺ型膠原酶的方法結(jié)合Dextran不連續(xù)梯度離心，能夠穩(wěn)定的分離出足夠數(shù)量的胰島。同時(shí)通過DTZ染色，體外分泌和灌流試驗(yàn)和PI/A0染色，較為全面的評估了胰島的純度、活性和分泌功能，為分離純化的胰島做鑒定和質(zhì)量

2、監(jiān)控提供了多種手段。提示：脂聯(lián)素與胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能密切相關(guān)。血清脂聯(lián)素水平隨著胰島素抵抗的加重而降低；與此同時(shí)，脂聯(lián)素通過抑制胰島在低糖環(huán)境下的胰島素分泌和促進(jìn)高糖時(shí)的胰島素分泌，而起到對胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用。從已有的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，尚無法完全解答脂聯(lián)素通過何種信號途徑作用于胰島的胰島素分泌，或作用于胰島素分泌的哪個(gè)環(huán)節(jié)這一問題，AMPK將是其中的一條可能的信號傳導(dǎo)途徑。 另一方面，本研究利用基因工程，以pET22b(+