單側(cè)腎上腺切除對(duì)哮喘大鼠嗜鉻細(xì)胞轉(zhuǎn)變的細(xì)胞及補(bǔ)腎方的干預(yù)作用.pdf

1、目的：本研究旨在通過建立腎陽虛模型來探討單側(cè)腎上腺切除對(duì)哮喘大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞轉(zhuǎn)變的影響及補(bǔ)腎方的干預(yù)作用，從而進(jìn)一步揭示嗜鉻細(xì)胞表型轉(zhuǎn)變與哮喘發(fā)病的關(guān)系。
　　 方法：用卵蛋白致敏、激發(fā)方法建立哮喘模型，56只雄性SD大鼠隨機(jī)分為7組，分別為哮喘組、單側(cè)腎上腺切除哮喘組(手術(shù)哮喘組)、補(bǔ)腎哮喘組(補(bǔ)腎組)、單側(cè)腎上腺切除補(bǔ)腎哮喘組(手術(shù)補(bǔ)腎組)、地塞米松哮喘組(地米組)、單側(cè)腎上腺切除地塞米松哮喘組(手術(shù)地米組)及正常對(duì)照組。

2、采用全身體積描計(jì)法檢測(cè)各組大鼠氣道阻力變化情況；光鏡觀察各組人鼠腎上腺髓質(zhì)的病理改變，電鏡觀察各組火鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)；免疫組化法檢測(cè)腎上腺髓質(zhì)中苯乙醇胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(PhenylethanolamineN-methyl transferase，PNMT)、GDP解離抑制因子(Rho GDPdissociation inhibitorα，Rho GDIα)及外周蛋白(Peripherin)的表達(dá)；RT-PCR和weste

3、rn blot法分別檢測(cè)腎上腺髓質(zhì)中Rho GDIα、Peripherin mRNA及其蛋白質(zhì)的表達(dá)水平；ELISA法檢測(cè)各組大鼠血清中腎上腺素(Epinephrine，EPI)水平的變化。
　　 結(jié)果：⑴與正常對(duì)照組相比，哮喘組大鼠腎上腺髓質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞明顯，可見空泡變性或脂質(zhì)增多，氣道周圍可見大量炎癥細(xì)胞浸潤；手術(shù)哮喘組大鼠的腎上腺髓質(zhì)及肺臟結(jié)構(gòu)破壞則較哮喘組進(jìn)一步加劇，補(bǔ)腎組和地米組腎上腺髓質(zhì)及肺臟結(jié)構(gòu)破壞較哮喘組減輕；與手術(shù)

4、哮喘組相比，手術(shù)補(bǔ)腎組和手術(shù)地米組腎上腺髓質(zhì)及肺臟結(jié)構(gòu)破壞較輕。電鏡下，對(duì)照組腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞形態(tài)規(guī)整，線粒體結(jié)構(gòu)清晰，嗜鉻顆粒數(shù)目多，密度均勻；與對(duì)照組相比，哮喘組嗜鉻細(xì)胞胞漿及線粒體出現(xiàn)腫脹，分泌顆粒減少；手術(shù)哮喘組除了上述表現(xiàn)，還可見髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞出現(xiàn)凋亡及突起樣改變，而補(bǔ)腎組和地米組結(jié)構(gòu)破壞程度較哮喘組有所減輕；與手術(shù)哮喘組相比，手術(shù)補(bǔ)腎組和手術(shù)地米組腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞病變減輕。⑵與對(duì)照組相比，哮喘組大鼠髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞中PNMT的

5、表達(dá)及血清中EPI水平明顯降低(P<0.05)；與哮喘組相比，手術(shù)哮喘組較哮喘組進(jìn)一步降低(P<0.05)，而補(bǔ)腎組和地米組中PNMT及EPI的表達(dá)增高(P<0.05)；與手術(shù)哮喘組相比，其在手術(shù)補(bǔ)腎組和手術(shù)地米組表達(dá)增高(P<0.05)。⑶Rho GDIα與PNMT的表達(dá)趨勢(shì)相類似，在對(duì)照組中，Rho GDIα有明顯的表達(dá)；與對(duì)照組相比，哮喘組表達(dá)降低(P<0.05)；與哮喘組相比，手術(shù)哮喘組較哮喘組進(jìn)一步降低(P<0.05)，而補(bǔ)腎

6、組和地米組表達(dá)增高(P<0.05)；與手術(shù)哮喘組相比，手術(shù)補(bǔ)腎組和手術(shù)地米組表達(dá)增高(P<0.05)。⑷在各組大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞中均可見Peripherin的表達(dá)，與對(duì)照組相比，Peripherin在哮喘組表達(dá)增高(P<0.05)；與哮喘組相比，手術(shù)哮喘組中表達(dá)進(jìn)一步增高(P<0.05)，補(bǔ)腎組和地米組表達(dá)降低(P<0.05)；與手術(shù)哮喘組相比，手術(shù)補(bǔ)腎組和手術(shù)地米組表達(dá)降低(P<0.05)。
　　 結(jié)論：①單側(cè)腎上腺切除能