注射用九種水溶性維生素凍干粉針的制備及其含量測(cè)定.pdf

1、本文將九種水溶性維生素：維生素B1(VB1)、維生素B6(VB6)、維生素B12(VB12)、維塵素C(Vc)、煙酰胺、葉酸、D-生物素、核黃素磷酸鈉、泛酸鈉應(yīng)用冷凍干燥法制備注射用九種水溶性維生素凍干粉針，優(yōu)化了其處方和制備工藝，建立了含量分析方法。 第一部分考察了不同處方組成如凍干保護(hù)劑種類、藥物溶液的粘度等，對(duì)凍干工藝及其凍結(jié)方式等對(duì)凍干產(chǎn)品的成形、水分含量及復(fù)溶速度等的影響。結(jié)果表明，選用海藻糖(300mg/瓶)作為凍干

2、保護(hù)劑，4mL灌裝量，反復(fù)預(yù)凍的方法進(jìn)行制備注射用九種水溶性維生素凍干粉針效果較好。 第二部分應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)九種維生素成分進(jìn)行含量分析檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)分別分為三組進(jìn)行測(cè)定： (1)時(shí)酸、D.生物素、對(duì)羥基苯甲酸甲酯的含量測(cè)定采用DiamonsilTM ODS色譜柱，磷酸二氫鉀緩沖液-乙腈為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗脫，流速為1.5 mL/min，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200 nm。在該色譜條件下，葉酸、D-生物素、對(duì)羥

3、基苯甲酸甲酯線性范圍分別在8.05～24.15 ug/mL(R=0.9995)、1.27～3.81ug/mL(R=0.9992)、9.95～29.85 ug/mL(R=0.9991)，三種成份回收率為96.3～104.2％，日間和日內(nèi)精密度的RSD都在3.60％以內(nèi)，最低檢測(cè)濃度分別為0.30 ug/mL、1,00 ug/mL、0.10 ug/mL。 (2)煙酰胺、VB6、VB1、泛酸鈉、VC、核黃素磷酸鈉的含量測(cè)定采用DIKM

4、A氨基色譜柱，0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液.乙腈(27：73，V/V)為流動(dòng)相,流速為1.0 mL/min，柱溫30℃;煙酰胺、VB1、VB6、泛酸鈉，VC的紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm；核黃素磷酸鈉熒光檢測(cè)波長(zhǎng)λex=445 nm，λem=520nm。在該色譜條件下，煙酰胺、VB6、VB1、泛酸鈉、VC、核黃素磷酸鈉線性范圍分別30.22～90.66 ug/mL(R=0.9999)、3.76～11.28～ug/mL(R=0.9992

5、)、2.38～7.14 ug/mL(R=0.9999)、12.44～37.32ug/mL(R=0.9995)、85.06～255.18ug/mL(R=0.9998)、1.94～11.64ug/mL(R=0.9999)。六種成份回收率為96.8～ 104.9％，日間和日內(nèi)精密度的RSD都在3.40％以內(nèi)，最低檢測(cè)濃度分別為0.15、0.30、0.80、5.00、1.40、0.15ug/mL. (3)VB12 的含量測(cè)定采用

6、DiamonsilTM ODS色譜柱，以磷酸鹽緩沖溶液一乙腈(90：10.V/V)作為A流動(dòng)相,乙腈-水-磷酸(499：499：2，V/V/V)作為B流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗脫，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200 nm，在該色譜條件下，VBl2線性范圍為0.5～1.5ug/mL(R=0.9996)，回收率101.0～102.5％，日間和日內(nèi)精密度的RSD都在1.80％以內(nèi).最低檢測(cè)濃度分別為0.40ug/mL。 第三部分采用高效毛細(xì)管電泳法(

7、HPCE)的膠束毛細(xì)管色譜(MECC)模式分離和同時(shí)測(cè)定注射用水溶性維生素的含量。應(yīng)用未涂層熔融石英毛細(xì)管67cm(有效長(zhǎng)度55 cm)×50 um；運(yùn)行緩沖液為50 mmol/L SDS-50 mmol/L的硼酸鈉溶液(pH 8.33);6.89KPa×10 sec壓力進(jìn)樣；運(yùn)行電壓15.0kV：檢測(cè)波長(zhǎng)214nm;毛細(xì)管柱溫25℃。在該色譜條件下，注射用水溶性維生素中的九種成份分離完全,VB1、VB6、VB12 VC、煙酰胺、葉酸、

8、D-生物素、核黃素磷酸鈉、泛酸鈉范線性范圍分別為2.405～19.24ug/mL(R=0.9998)、3.80～30.40ug/mL(R=0.9997)、0.39～3.12 ug/mL(R=0.9992)、87.50～700.00ug/mL(R=0.9990)、31.00～248.00ug/mL(R=0.9991)、0.3l～2.48ug/mL(R=0.9990)、0.465～3.72ug/mL(R=0.9993)、3.80～30.40

9、～ug/mL(R=0.9982)、4.125～33.00ug/mL(R=0.9995)；九種成份回收率為95.8～100.8％：日間和日內(nèi)精密度峰面積的RSD在3.30％以內(nèi)，遷移時(shí)間的RSD在2.70％以內(nèi);最低檢測(cè)濃度分別為0.18、0.16、0.10、0.45、0.60、0.10、0.12、0.23、0.41ug/mL，與高效液相色譜分析方法相比較，此方法更加方便、簡(jiǎn)單。 本論文針對(duì)冷凍干燥法制備注射用九種水溶性維生素凍干