Tim-3胃癌免疫細(xì)胞上表達(dá)的臨床意義和生物學(xué)功能的初步研究.pdf

1、蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名：至立邀日期：2Z笙二[二2rTim3在胃癌免疫細(xì)胞上表達(dá)的臨床意義和生物學(xué)功能的初步研究

2、中文摘要Tim一3在胃癌免疫細(xì)胞上表達(dá)的臨床意義和生物學(xué)功能的初步研究中文摘要中又兩斐Tim3是重要的免疫調(diào)節(jié)分子，在腫瘤進(jìn)展和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮了重要作用。然而不同免疫細(xì)胞上Tim3表達(dá)的臨床意義和生物學(xué)作用還知之甚少。本研究通過臨床標(biāo)本檢測(cè)和體內(nèi)外功能研究，分析了Tim3在胃癌免疫細(xì)胞表達(dá)的臨床意義，調(diào)控機(jī)制和生物學(xué)功能。第一部分：胃癌患者NK細(xì)胞上Tim3異常表達(dá)及臨床意義目的擬通過檢測(cè)胃癌患者體內(nèi)免疫細(xì)胞上Tim3的表達(dá)情況，結(jié)合臨

3、床資料分析該分子表達(dá)與胃癌進(jìn)展的關(guān)系。方法收集初診胃癌患者和健康對(duì)照組的外周血以及對(duì)應(yīng)的癌組織和癌旁正常組織，流式細(xì)胞術(shù)分析Tim一3在CD56NK細(xì)胞上表達(dá)，并結(jié)合臨床資料分析該分子表達(dá)的臨床意義。利用Gal9蛋白體外激活NK，觀察該分子對(duì)NK生物學(xué)功能的影響。為進(jìn)一步驗(yàn)證臨床中觀測(cè)到的現(xiàn)象，繼而開展了相應(yīng)的動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)。首先利用胃癌細(xì)胞株MCF皮下移植瘤構(gòu)建荷瘤小鼠模型，于荷瘤不同時(shí)間點(diǎn)，檢測(cè)外周血和腫瘤組織浸潤(rùn)的NK上Tim3動(dòng)態(tài)表

4、達(dá)情況。隨后利用Tbet√一基因敲除小鼠、Eomes乒基因敲除小鼠和Tbet斗聯(lián)合Eomes斗雙基因敲除小鼠，以wT小鼠作為對(duì)照，分析核轉(zhuǎn)錄因子T—bet和Eomes在調(diào)控NK細(xì)胞表達(dá)Tim一3中否發(fā)揮了作用。結(jié)果無論健康對(duì)照組還是胃癌患者，在外周淋巴細(xì)胞群體中Tim3主要表達(dá)于NK細(xì)胞而非B細(xì)胞或T細(xì)胞。擴(kuò)大樣本進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，胃癌患者NK細(xì)胞上Tim一3表達(dá)則顯著高于健康對(duì)照組，兩者存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。體外功能學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在rhlL12