CD4+T細胞高表達Tim-3與膿毒癥免疫紊亂的關(guān)系.pdf

1、目的：膿毒癥是指以全身性感染合并全身炎癥反應(yīng)綜合征導致器官功能損害為特征的復雜臨床綜合征,是嚴重創(chuàng)傷患者及ICU患者最常見的死亡原因之一。膿毒癥時機體免疫系統(tǒng)大量淋巴細胞凋亡,包括B淋巴細胞、T淋巴細胞。肝臟不僅是膿毒癥中最容易受損的器官之一，還是膿毒癥時各損害臟器中最重要的器官。膿毒癥開始時為了維持免疫平衡，肝臟內(nèi)CD4+ T細胞數(shù)量增加。Tim-3是T細胞免疫球蛋白黏蛋白 TIM分子家族中的一員，最初發(fā)現(xiàn)特異性表達于鼠類 CD4+T

2、h1細胞表面而不表達于Th2細胞表面?，F(xiàn)已證實Tim-3對Th1細胞反應(yīng)起負調(diào)節(jié)作用，通過抑制細胞因子分泌和細胞增殖來調(diào)節(jié)機體的免疫平衡。Tim-3在固有免疫及適應(yīng)性免疫應(yīng)答中均扮演重要的角色,其表達失調(diào)與多種自身免疫性疾病的發(fā)病密切相關(guān)。但是,目前關(guān)于Tim-3在膿毒癥誘導的免疫紊亂中的作用的研究還較少。因此，本課題觀察了Tim-3在膿毒癥患者外周血CD4+ T細胞表面以及在膿毒癥小鼠肝臟CD4+ T細胞表面表達變化情況，并探究了Ti

3、m-3與CD4+T細胞功能的關(guān)系及其在膿毒癥免疫紊亂中的作用。
　　方法：
　　1、收集健康志愿者及膿毒癥患者血液標本，通過流式細胞術(shù)檢測膿毒癥患者外周血CD4+ T細胞Tim-3表達情況；
　　2、構(gòu)建膿毒癥動物模型——盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)，以假手術(shù)組為對照組，其僅予以麻醉及開腹而不行盲腸結(jié)扎及穿孔。CLP術(shù)后8h、24h及48h獲取小鼠肝臟，通過流式細胞術(shù)檢測膿毒癥小鼠及假手術(shù)組小鼠肝臟CD4+ T細胞Tim-

4、3表達情況及Tim-3+CD4+T細胞功能狀態(tài)。
　　結(jié)果:
　　1、Tim-3在膿毒癥患者外周血CD4+ T細胞表面表達情況
　　膿毒癥患者外周血CD4+ T細胞表達Tim-3的比例較健康對照組高（3.4％±0.99%vs0.41%±0.07%，p=0.0002）。
　　2、Tim-3在膿毒癥小鼠肝臟CD4+ T細胞表面表達情況及與細胞功能狀況之間的關(guān)系
　　A、同對照組小鼠比較，膿毒癥后小鼠肝臟CD4+

5、 T細胞表面Tim-3表達上調(diào)；
　　B、同Tim-3-CD4+T細胞比較，Tim-3+CD4+T細胞分泌的細胞因子（IFN-γ、IL-4）均明顯減少，并且 IFN-γ/IL-4比率減小，預(yù)示膿毒癥時肝臟Tim-3+CD4+ T細胞作用趨于抗炎反應(yīng)；
　　C、同對照組比較，膿毒癥后小鼠肝臟CD4+ T細胞表面Tim-3及PD-1共表達增加，說明Tim-3是CD4+ T細胞的一個負調(diào)節(jié)因子。
　　結(jié)論：膿毒癥患者外周血C