家族性糖皮質(zhì)激素缺乏伴生長激素缺乏的基因突變分析及治療觀察.pdf

1、目的:
　　分析一例FGD伴GHD患者的分子遺傳學(xué)特點，探討糖皮質(zhì)激素缺乏對生長激素分泌的影響。
　　方法:
　　1.簽署知情同意書后收集一例FGD伴GHD患者及其父母的靜脈血，置于-80℃冰箱保存，同時收集、整理患者的臨床資料。
　　2.提取DNA，根據(jù)已報道的FGD致病基因(MC2R、MRAP、StAR、MCM4、NNT及TXNRD2基因)，用primer3設(shè)計引物，引物由上海寰榮生物技術(shù)有限公司合成。PCR

2、擴增目的基因，ABI梯度PCR儀進行PCR反應(yīng)，而后用1％瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物。將PCR產(chǎn)物交由上海寰榮公司純化、切膠回收及測序。Chromas圖譜分析，將結(jié)果與NCBI基因庫進行對比。
　　3.給予氫化可的松早20mg、晚10mg及左旋甲狀腺素12.5μ g/天、迪巧300g一天2次口服，生長激素5IU皮下注射治療。
　　4.定期隨訪，隨訪時間間隔為3個月，了解患者食欲、活動量及體溫狀況，測量患者身高及性腺發(fā)育程度

3、，監(jiān)測其血壓、血生化、血糖、血漿皮質(zhì)醇、ACTH、GH、IGF-1、促性腺激素及甲狀腺激素等的水平，每年1次行左手腕X線正位片判斷骨齡情況，必要時行再次行生長激素激發(fā)試驗。
　　結(jié)果:
　　1.經(jīng)Chromas圖譜分析，患者的MC2R、MRAP、StAR、MCM4、NNT基因外顯子序列均未發(fā)現(xiàn)異常。
　　2.患者及其父母TXNRD2基因測序均發(fā)現(xiàn)第三外顯子上第5位和第24位堿基分別由C→T、G→T，前者密碼子由GCC→

4、GCU，其編碼的氨基酸不變，后者密碼子由GCC→UCC使原本編碼的丙氨酸變成絲氨酸(p.A66S)，NCBI基因庫未發(fā)現(xiàn)此前有該突變報道。
　　3.隨訪期間患者一般情況可，身高增長迅速，一年半增高約17cm，睪丸發(fā)育好，血漿皮質(zhì)醇水平極低而ACTH維持在高水平，促性腺激素水平正常，無水電解質(zhì)紊亂，應(yīng)用生長激素1年半后再次行生長激素激發(fā)試驗提示生長激素分泌潛能恢復(fù)正常。
　　結(jié)論:
　　1.本研究中患者及其父母的TXNR

5、D2基因均在第三外顯子編碼序列的第24位堿基上存在G→T，該突變?yōu)橛辛x突變還是基因多態(tài)性所致，需通過進一步研究證實。
　　2.伴有生長激素缺乏的FGD患者，經(jīng)足量的糖皮質(zhì)激素治療后生長激素分泌潛能可恢復(fù)正常，期間用生長激素治療后身高情況明顯改善，因此FGD基因突變引起的GHD可能性不大。
　　3.由于FGD與Addison病臨床表現(xiàn)類似，對于被診為Addison病的患者，如無低血壓、失鹽等表現(xiàn)，且在長期隨訪中經(jīng)足量糖皮質(zhì)激素