李斯特菌分子鑒定與分型及其在安全牛奶生產(chǎn)中的應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、該項(xiàng)目首先對(duì)FDA法、NGFIS法和國(guó)標(biāo)法三種李斯特菌選擇性增菌肉湯進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn),結(jié)果表明:改良的NGFIS法對(duì)環(huán)境樣品李斯特菌的分離率最高,FDA法對(duì)消毒牛奶中李斯特菌的檢出率最高.該試驗(yàn)以具有李斯特菌種、屬特異性的iap基因和單核細(xì)胞增多性李斯特菌特異的溶血素基因(hlyA)作為靶目標(biāo),分別設(shè)計(jì)單一PCR、雙重PCR和三重PCR來(lái)鑒定李斯特菌,并比較了三種PCR方法的特異性.結(jié)果表明:建立的單一PCR只能鑒定Lm,而雙重PCR和三重

2、PCR方法對(duì)于李斯特菌屬和Lm標(biāo)準(zhǔn)株均具有良好的特異性,但是雙重PCR不能鑒定部分Lm食品分離株,而三重PCR不僅可用于李斯特菌屬細(xì)菌的特異性鑒定還可用于混合培養(yǎng)物中Lm的特異性鑒別.該研究還建立了用于追蹤牛奶加工過(guò)程中Lm污染源和污染途徑的RAPD分型方法,為了提高RAPD分型法的重復(fù)性和分辨力,該研究采用兩條隨機(jī)引物分別進(jìn)行RAPD,綜合分析結(jié)果的策略.結(jié)果表明:建立的RAPD方法對(duì)17株不同來(lái)源的Lm分離株均具有良好的分型性和分辨

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