酸乳中益生菌分鑒方法的研究.pdf

1、益生菌的功能性和保健功效已被世界公認，而且還在不斷研究發(fā)現(xiàn)其新的保健功效。目前，益生菌在食品、藥品等行業(yè)中的應(yīng)用越來越廣泛，在食品行業(yè)中主要應(yīng)用于乳制品。益生菌產(chǎn)品中益生菌的種類和數(shù)量是衡量該類產(chǎn)品質(zhì)量優(yōu)劣的重要指標(biāo)之一。然而目前對益生菌產(chǎn)品中不同種類的益生菌尚無簡單、快速、有效的分鑒方法，因而難于對該類產(chǎn)品進行質(zhì)量監(jiān)控。故尋找簡單、快速、有效的益生菌分鑒方法勢在必行。
　　 本課題以酸乳為研究對象，采用生理生化法、菌體全細胞蛋

2、白電泳法、菌體全細胞電泳法、菌體全細胞紅外光譜分析等多種方法對酸乳中不同種類的益生菌進行了檢測與鑒定，為快速、準確地分鑒益生菌提供科學(xué)依據(jù)和實驗方法，以推動我國益生菌乳品的良性發(fā)展。通過實驗，主要得出以下結(jié)論：
　　 通過生理生化法對益生菌進行檢測鑒定，主要考查了五種實驗方法：①活菌指示劑TTC-MRS瓊脂法，結(jié)果表明：pH5.4和pH7.0的TTC-MRS瓊脂培養(yǎng)基可用于保加利亞乳桿菌與嗜熱鏈球菌的鑒定。在pH5.4的TTC-

3、MRS瓊脂培養(yǎng)基中，首先出現(xiàn)菌落的都是保加利亞乳桿菌；在pH7.0的TTC-MRS瓊脂培養(yǎng)基中，首先出現(xiàn)菌落的都是嗜熱鏈球菌，實驗重現(xiàn)性良好。②CaCO3 GYP培養(yǎng)基透明圈法，結(jié)果表明：嗜熱鏈球菌形成的透明圈呈明顯圓形，很規(guī)整，菌落也呈光滑的圓球狀；而保加利亞乳桿菌所形成的透明圈形狀各異，不規(guī)整，菌落形態(tài)也不規(guī)則。因此，可以根據(jù)保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌在CaCO3 GYP瓊脂培養(yǎng)基中生長所形成透明圈形態(tài)的差異和菌落自身的形態(tài)差異來鑒

4、定它們。③MRS瓊脂柱狀厭氧管法，結(jié)果表明：嗜熱鏈球菌菌落形態(tài)呈圓餅狀，菌落周圍比較規(guī)則，保加利亞
　　 對益生菌的全細胞蛋白進行電泳，結(jié)果表明：保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌在7.5％的分離膠濃度條件下的全細胞蛋白圖譜有明顯差異，通過其條帶積分光密度分析可見，保加利亞乳桿菌有10條蛋白條帶，嗜熱鏈球菌只有6條蛋白條帶，保加利亞乳桿菌的蛋白條帶遠遠多于嗜熱鏈球菌的蛋白條帶，并且2＃蛋白條帶是區(qū)分兩者的關(guān)鍵，其蛋白含量和電泳遷移率都截

5、然不同。
　　 通過對鮮乳、酸乳中蛋白質(zhì)的電泳、薄層色譜對比分析，無論是電泳還是薄層色譜均未能達到對保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌分離鑒定的目的；但是，令人欣慰的是，無論是從電泳中蛋白條帶、蛋白含量上，還是從薄層色譜中斑點的數(shù)量上，都可以清楚的看出發(fā)酵酸乳與鮮乳中蛋白質(zhì)的差異，從而可以鑒定酸乳是否通過益生菌發(fā)酵生產(chǎn)的。
　　 通過對益生菌菌體全細胞的電泳分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌體細胞在凝膠中泳動比較雜亂，沒有規(guī)律，并且無法進行在線監(jiān)