產(chǎn)抗真菌蛋白(AFP)的巨曲霉菌的選育及其在制麥過(guò)程中的應(yīng)用.pdf

1、巨曲霉菌(Aspergillusgiganteus)可分泌一種小分子量抗真菌蛋白(AntifungalProtein,AFP),能夠有效抑制某些產(chǎn)毒絲狀真菌的生長(zhǎng),尤其是一些植物致病真菌,具有安全、高效、廣譜、穩(wěn)定等特點(diǎn)。經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證,這種蛋白可作為天然抗生素,用于控制啤酒制麥過(guò)程中的真菌污染及真菌毒素殘留問(wèn)題。
　　本研究從土壤中分離出一株可產(chǎn)抗真菌蛋白的菌株,通過(guò)形態(tài)觀察和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等方法鑒定其為巨曲霉菌,編號(hào)AF-11。利

2、用纖維素陽(yáng)離子交換柱層析法和凝膠柱層析法可從該菌的發(fā)酵上清液中分離純化出高活性的抗真菌蛋白AFP,該蛋白對(duì)青霉屬、曲霉屬和鐮刀霉屬等產(chǎn)毒絲狀真菌的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用。
　　通過(guò)設(shè)計(jì)優(yōu)化試驗(yàn),確定巨曲霉菌AF-11最佳發(fā)酵條件為:菌種初始接種量10％,裝液量80ml/500ml,初始pH7.0,搖床轉(zhuǎn)速120r/min,發(fā)酵溫度30℃,發(fā)酵時(shí)間5d。在最優(yōu)發(fā)酵條件下,每500ml發(fā)酵上清液中可含AFP蛋白1.0g-1.2g。

3、r>　　建立AFP制麥方法,即在浸麥后期和發(fā)芽初期使用AFP處理大麥表面的絲狀真菌,處理劑量為18μg/g(絕干大麥),經(jīng)檢測(cè)曲霉菌的抑制率可達(dá)85.3%,鐮孢霉菌的抑制率可達(dá)87.2%。低濃度AFP不僅抑制有害絲狀真菌效果顯著,且無(wú)殘留,無(wú)特征氣味;經(jīng)驗(yàn)證,AFP不會(huì)影響發(fā)酵過(guò)程中酵母、乳酸菌等有益菌的生長(zhǎng),亦對(duì)人體細(xì)胞無(wú)害,優(yōu)勢(shì)大于化學(xué)殺菌劑;
　　通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明,AFP能有效控制麥芽中真菌毒素的殘留,如DON,其效果更優(yōu)于其他